[發明專利]一種糖化血清白蛋白檢測試劑及其應用

在審

• 申請號: 201510609529.8
• 申請日: 2015-09-23
• 公開（公告）號: CN105241830A
• 公開（公告）日: 2016-01-13
• 發明（設計）人: 燕啟江;郭周萍;龐柳;劉菲菲
• 申請（專利權）人: 廣州金域醫學檢驗中心有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/78
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務所(普通合伙) 11470
• 代理人: 劉曄

技術領域

本發明屬于醫學檢驗技術領域，具體涉及一種糖化血清白蛋白檢測試劑及其應用。

背景技術

糖化血清白蛋白（glyecatedalbumin，GA）是葡萄糖通過非酶促糖基化反應與血漿中白蛋白結合形成的酮胺類化合物。糖化血清白蛋白值可以反映糖尿病患者檢測前2-3周的平均血糖水平，與血糖監測的金標準HbA_IC相比，GA可以反映血糖短期波動的情況，可以更準確的反映糖尿病患者的血糖情況。良好的血糖控制能有效延緩糖尿病、慢性并發癥的發生和發展。因此，糖化血清白蛋白的測定在糖尿病的診斷、近期監控和療效評價方面均具有重要的意義。

在上世紀80年代，日本學者就研發了高壓液相離子交換法（HPLC法）進行GA測定。雖然HPLC法測定GA可準確檢測糖尿病患者短期血糖控制的總體水平，但是該測定方法在當時的價格較高，處理樣本量小，不利于臨床常規的開展和應用。接著美國研制出一種特異性較高的糖化血清白蛋白的測定方法，該檢測方法是一種固體酶法，解決了當時檢測糖化血清白蛋白價格高的問題。但是，該檢測方法操作繁瑣，檢測時需要復溶，而且測定的結果重復性較低，大大的限制了該檢測試劑的應用。

近年來，隨著對糖化血清白蛋白檢測的深入研究，為了更方便、快捷的檢測出糖化血清白蛋白的濃度，學者們研究出了一種液態酶法檢測的糖化血清白蛋白的檢測方法，該液態酶法是一種簡單、快速、靈敏、準確定量的檢測方法，而且該檢測方法的測定結果準確高、重復性好，是一種較為理想的糖化血清白蛋白的檢測方法。

中國專利申請201410401260.X公開了一種穩定的糖化白蛋白檢測試劑盒，該試劑盒由試劑R1、試劑R2和試劑R3組成，所述試劑R1主要由緩沖液、糖化氨基酸氧化酶、白蛋白蛋白酶、過氧化物酶、過氧化氫酶、4-氨基安替比林和穩定劑組成；所述試劑R2主要由緩沖液、白蛋白蛋白酶、過氧化物酶、色原和穩定劑組成；所述試劑R3主要由緩沖液、溴甲酚綠和表面活性劑組成。該試劑是一種簡單、快速、靈敏、準確的檢測試劑，而且該試劑穩定性高，有利于延長檢測試劑的保質期。但是，該檢測試劑中的溴甲酚綠可以與非白蛋白類蛋白質結合，影響血清白蛋白的檢測濃度，從而導致檢測結果誤差較大，影響診斷結果，不利于該試劑的推廣和應用。

因此，研究和發開出一種穩定性高，檢測結果誤差小，檢測結果重復性高的糖化血清白蛋白檢測試劑是目前亟需解決的難題。

發明內容

為了克服現有技術中糖化血清白蛋白檢測試劑存在檢測結果準確性差、重復性低的缺陷，本發明的目的是提供一種糖化血清白蛋白檢測試劑及其應用，以解決上述問題。

本發明提供了一種糖化血清白蛋白檢測試劑，包括試劑R1、試劑R2和試劑R3，所述試劑R1包括以下組分：

MES緩沖液10-60mmol/L、糖化氨基酸氧化酶2-15U/ml、蛋白酶5-10U/ml、氯化鈉20-50μmol/L和防腐劑0.1-1g/L；

所述試劑R2包括以下組分：

MES緩沖液10-60mmol/L、N,N-雙(4-磺丁基)-3-甲基苯胺二鈉鹽1-10mmol/L、4-氨基安替吡啉5-20mmol/L、過氧化物酶1-8U/ml、多元醇5-10mg/ml、烷基聚葡萄糖苷10-30mmol/L和防腐劑0.1-1g/L；

所述試劑R3包括以下組分：

醋酸鹽緩沖液20-50mmol/L、溴甲酚紫2-15mmol/L、烷基聚葡萄糖苷30-80mmol/L和防腐劑0.1-1g/L。

優選地，所述的糖化血清白蛋白檢測試劑包括試劑R1、試劑R2和試劑R3，所述試劑R1包括以下組分：

MES緩沖液40mmol/L、糖化氨基酸氧化酶8U/ml、蛋白酶6U/ml、氯化鈉30μmol/L和防腐劑0.2g/L；

所述試劑R2包括以下組分：

MES緩沖液40mmol/L、N,N-雙(4-磺丁基)-3-甲基苯胺二鈉鹽4mmol/L、4-氨基安替吡啉10mmol/L、過氧化物酶4U/ml、多元醇8mg/ml。烷基聚葡萄糖苷20mmol/L和防腐劑0.2g/L；

所述試劑R3包括以下組分：

醋酸鹽緩沖液30mmol/L、溴甲酚紫5mmol/L、烷基聚葡萄糖苷50mmol/L和防腐劑0.2g/L。

進一步地，所述防腐劑為proclin300。所述的proclin300具有優越的兼容性、穩定性和低毒性的優點而被廣泛應用于診斷試劑或產品中控制微生物含量的高效滅菌劑，可以有效的延長檢測試劑的保質期。