[發(fā)明專利]誘導(dǎo)普通小球藻ZF藻株高效積累DHA的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510609477.4
• 申請日: 2015-09-23
• 公開（公告）號: CN105132484B
• 公開（公告）日: 2019-04-19
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孟春曉;李國強(qiáng);高政權(quán);吳冠勛;郭艷蕓;付圣貴;胡碩;沈義成;孫海風(fēng);鄧素貞;陳國強(qiáng);張瑞豪
• 申請（專利權(quán)）人: 山東理工大學(xué)
• 主分類號: C12P7/64
• 分類號: C12P7/64;C12R1/89
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 鄧宇

本發(fā)明提供一種誘導(dǎo)普通小球藻ZF藻株高效積累DHA的方法，其特征在于采用如下步驟：1)制備藻液：在23℃±2℃、光強(qiáng)1900±100lx和光暗比為12h/12h的條件下，采用1/4倍BG11培養(yǎng)基培養(yǎng)普通小球藻ZF藻株細(xì)胞28天到對數(shù)生長期，獲得用于植物生長調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)的藻液，培養(yǎng)期間每14天加一次1倍濃度的BG11營養(yǎng)鹽；2)積累DHA：取對數(shù)生長期藻液200mL置于300mL三角錐形瓶中，然后加入植物生長調(diào)節(jié)劑6?BA，植物生長調(diào)節(jié)劑6?BA在藻液中的濃度為0.01±0.001mg/L，于23℃±2℃進(jìn)行誘導(dǎo)處理14±1天，處理階段每天人工搖藻不少于3次，相鄰搖藻時間間隔不小于2小時，實現(xiàn)DHA在藻液中的積累。本發(fā)明簡單易行、成本低廉，能在短期內(nèi)顯著積累DHA含量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明提供一種誘導(dǎo)普通小球藻ZF藻株高效積累DHA的方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

小球藻(Chlorella)是一種常見的水生單細(xì)胞藻類，是綠藻小球藻科中的一個重要屬，生態(tài)分布廣泛，在海水和淡水中均有分布，目前包括大約10個種。小球藻細(xì)胞內(nèi)含有豐富的蛋白質(zhì)(干重的50％)、必需氨基酸、多糖、脂類(脂肪酸積累的結(jié)果)、葉綠素、胡蘿卜素、和維生素等等，在保健食品、水產(chǎn)養(yǎng)殖(飼料添加劑)、化妝品、醫(yī)藥等領(lǐng)域內(nèi)應(yīng)用廣泛，國內(nèi)外市場供不應(yīng)求。與美國、日本、以色列等國家相比，我國的小球藻工業(yè)化大規(guī)模培養(yǎng)水平相對滯后。普通小球藻ZF藻株是一種球形單細(xì)胞淡水藻類，通常生長在富營養(yǎng)化的水體中，但在人工培養(yǎng)條件下能大量生長繁殖。營養(yǎng)鹽(氮、磷等)、光照、pH值、溫度、微量元素(鐵、錳、硒等)、碳酸氫銨、等因素均能影響小球藻生長。

全順式—7，10，13，16，19—二十二碳六烯酸(docosahexaenoic cid，簡稱DHA)，俗成腦黃金是一種對人體有著非常重要作用的多不飽和脂肪酸是ω-3不飽和脂肪酸家族中的重要成員，動和人本身不能合成必須從外界攝入。DHA具有重要的生理作用：與抗癌免疫有關(guān)，同時具有補(bǔ)腦健腦、提高視力、降血脂、降血壓、抗動脈粥樣硬化、抗炎等作用，有很大的應(yīng)用價值。目前DHA主要從魚油中獲得，但魚油來源的產(chǎn)品腥味較大，品質(zhì)不高，產(chǎn)量不穩(wěn)定。近來通過微藻提取純化DHA、EPA已經(jīng)成為國內(nèi)外研究的熱點。植物生長調(diào)節(jié)劑是植物體內(nèi)產(chǎn)生的對植物生長發(fā)育起調(diào)控作用的化學(xué)物質(zhì)，可分為五大類：生長素類、細(xì)胞分裂素類、赤霉素類、脫落酸和乙烯，而且這五大類生長調(diào)節(jié)劑在藻類中均已發(fā)現(xiàn)，植物生長調(diào)節(jié)劑對植物的生長發(fā)育具有明顯的促進(jìn)作用并已廣泛用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中。植物生長調(diào)節(jié)劑作為一種植物生長調(diào)節(jié)劑，具有操作簡單、誘導(dǎo)率高、速度快、造價低、損傷輕、無污染、安全性強(qiáng)等諸多優(yōu)點。微藻是進(jìn)行生長調(diào)節(jié)劑誘導(dǎo)的優(yōu)良材料，其結(jié)構(gòu)簡單、生命周期短、光敏性強(qiáng)、代謝過程極易受環(huán)境影響，也容易被檢測。