[發(fā)明專利]用于軟骨修復(fù)的具有組織誘導(dǎo)性的水凝膠的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510603546.0
• 申請日: 2015-09-21
• 公開（公告）號: CN105126163B
• 公開（公告）日: 2018-08-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 魯雄;胥杰龍;甘東林;王振銘;張晏寧
• 申請（專利權(quán)）人: 西南交通大學(xué)
• 主分類號: A61L27/22
• 分類號: A61L27/22;A61L27/24;A61L27/20;A61L27/52;A61L27/54;C08F290/10;C08F290/00
• 代理公司: 成都博通專利事務(wù)所 51208
• 代理人: 陳樹明

1.一種用于軟骨修復(fù)的具有組織誘導(dǎo)性的水凝膠的制備方法，其具體步驟如下：

A、多糖或蛋白的雙鍵化

將多糖或蛋白溶于磷酸鹽緩沖溶液中得到多糖或蛋白的質(zhì)量濃度為0.5～10％的溶液，然后，向溶液中滴加多糖或蛋白0.16～17.5倍質(zhì)量的甲基丙烯酸酐、甲基丙烯酸縮水甘油酯、甲基丙烯酸酯或甲基丙烯酸，然后在5℃～60℃下，攪拌反應(yīng)2～24小時；隨后，將溶液稀釋5倍，再進(jìn)行透析、干燥后得到雙鍵化的多糖或蛋白；

所述的多糖為殼聚糖，蛋白是明膠；

或者，所述的多糖是海藻酸鈉，蛋白是膠原；在加入甲基丙烯酸酐、甲基丙烯酸縮水甘油酯、甲基丙烯酸酯或甲基丙烯酸前，還先加入海藻酸鈉或膠原1倍摩爾量的EDC/NHS；

B、水凝膠的制備

將甲基丙烯酰胺化多巴胺單體溶于二甲亞砜得到甲基丙烯酰胺化多巴胺單體溶液，再將甲基丙烯酰胺化多巴胺單體溶液和A步得到的雙鍵化的多糖或蛋白共溶于磷酸鹽緩沖溶液中配制成混合液，混合液中雙鍵化的多糖或蛋白的質(zhì)量濃度為0.5-20％，甲基丙烯酰胺化多巴胺單體的質(zhì)量濃度為0.5-5％；然后，將光引發(fā)劑加入到混合溶液中，加入的光引發(fā)劑的質(zhì)量濃度為0.05～0.5％；再用波長為365nm、強(qiáng)度為2～10mw/cm²的紫外光，對混合液照射5～15分鐘，引發(fā)溶液聚合形成水凝膠；

C、生長因子的吸附

用磷酸鹽緩沖溶液、氯化鈉溶液或水對水凝膠進(jìn)行清洗，再用體積濃度為50～99％的乙醇溶液對水凝膠進(jìn)行脫水；清洗、脫水的操作進(jìn)行3次；然后將水凝膠轉(zhuǎn)移到生長因子濃度為0.02～0.2μg/ml的磷酸鹽緩沖溶液、氯化鈉溶液或水中，溶脹后即得。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于軟骨修復(fù)的具備組織誘導(dǎo)性的水凝膠的制備方法，其特征在于：所述的B步中的光引發(fā)劑是irgacure2959，irgacure184，irgacure127或irgacure500。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于軟骨修復(fù)的具備組織誘導(dǎo)性的水凝膠的制備方法，其特征在于：所述的C步中的生長因子是轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1、TGF-β2或TGF-β3。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于軟骨修復(fù)的具備組織誘導(dǎo)性的水凝膠的制備方法，其特征在于：所述的C步中的生長因子是骨形態(tài)發(fā)生蛋白BMP-2或BMP-7。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于軟骨修復(fù)的具備組織誘導(dǎo)性的水凝膠的制備方法，其特征在于：所述的C步中的生長因子是胰島素生長因子IGF-Ⅰ或IGF-Ⅱ。