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[發(fā)明專(zhuān)利]合成低聚半乳糖的專(zhuān)用菌株及用其合成低聚半乳糖的方法有效

專(zhuān)利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201510600511.1 申請(qǐng)日: 2015-09-18
公開(kāi)(公告)號(hào): CN105219661B 公開(kāi)(公告)日: 2019-01-11
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 程海榮;安瑾;張樂(lè)彬;李莉娟;王犇;李云楓 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: 上海交通大學(xué);淄博珍瑭生物科技有限公司
主分類(lèi)號(hào): C12N1/16 分類(lèi)號(hào): C12N1/16;C12P19/18;C12P19/14;C12P19/00;C12R1/645
代理公司: 上海漢聲知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31236 代理人: 郭國(guó)中
地址: 200240 *** 國(guó)省代碼: 上海;31
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摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 合成 半乳糖 專(zhuān)用 菌株 方法
【權(quán)利要求書(shū)】:

1.一種解脂亞羅威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11369,該酵母能合成β-半乳糖苷酶。

2.一種如權(quán)利要求1所述的解脂亞羅威酵母菌株在合成低聚半乳糖中的用途。

3.一種將如權(quán)利要求1所述的解脂亞羅威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:

S1、將解脂亞羅威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11369菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),培養(yǎng)結(jié)束后菌液分離得到解脂亞羅威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11369細(xì)胞;

S2、在分離得到的細(xì)胞中加入乳糖水溶液,在40~60℃,pH4.0~8.0條件下振蕩或攪拌,進(jìn)行轉(zhuǎn)化合成低聚半乳糖。

4.如權(quán)利要求3所述的解脂亞羅威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述發(fā)酵培養(yǎng)可以為高密度發(fā)酵培養(yǎng);該高密度發(fā)酵培養(yǎng)采用的培養(yǎng)基為含碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽以及水的培養(yǎng)基,培養(yǎng)條件為在pH值3.0~8.0,溫度25~35℃條件下振蕩或者攪拌。

5.如權(quán)利要求4所述的解脂亞羅威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述碳源為固體葡萄糖、葡萄糖母液中的一種或兩種,碳源用量為10~100克/升;所述氮源為蛋白胨、酵母粉、酵母浸膏、玉米漿干粉、玉米漿、磷酸氫二銨中的一種或幾種的混合,氮源的用量為5~25克/升;所述無(wú)機(jī)鹽為硫酸鎂、氯化錳、氯化銅中的一種或幾種,無(wú)機(jī)鹽用量為0~2.5克/升。

6.如權(quán)利要求3所述的解脂亞羅威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述發(fā)酵培養(yǎng)為高濃度碳源的發(fā)酵培養(yǎng);該高濃度碳源的發(fā)酵培養(yǎng)采用的培養(yǎng)基為含高濃度碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽以及水的培養(yǎng)基,培養(yǎng)條件為在pH值3~8,溫度25~35℃條件下振蕩或者攪拌。

7.如權(quán)利要求6所述的解脂亞羅威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述高濃度碳源為固體葡萄糖、葡萄糖漿、葡萄糖母液中的一種或多種,折合葡萄糖含量為200~300克/升;所述氮源為蛋白胨、酵母粉、酵母浸膏、玉米漿干粉、玉米漿、磷酸氫二銨中的一種或幾種的混合,氮源的用量為5~25克/升;所述無(wú)機(jī)鹽為硫酸鎂、氯化錳、氯化銅中的一種或幾種,無(wú)機(jī)鹽用量為0~2.5克/升。

8.如權(quán)利要求6所述的解脂亞羅威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,采用高濃度碳源的發(fā)酵培養(yǎng)時(shí),菌液分離得到的上清液為含有赤蘚糖醇的溶液,用于純化分離赤蘚糖醇,沉淀為解脂亞羅威酵母(Yarrowia lipolytica)CGMCC NO.11369細(xì)胞。

9.如權(quán)利要求6所述的解脂亞羅威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,采用高濃度碳源的發(fā)酵培養(yǎng)時(shí),步驟S2中可選擇加入葡萄糖氧化酶以及過(guò)氧化氫酶進(jìn)行轉(zhuǎn)化合成低聚半乳糖。

10.如權(quán)利要求3所述的解脂亞羅威酵母菌株用于合成低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述步驟S2后還包括當(dāng)轉(zhuǎn)化液中低聚半乳糖的含量不再增加時(shí)停止轉(zhuǎn)化,進(jìn)行純化精制,得到液體或者粉狀低聚半乳糖的步驟。

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