[發(fā)明專利]基于未修飾納米金與雙鏈DNA相互作用的比色法檢測DNA有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510590912.3 | 申請日： | 2015-09-16 |
| 公開（公告）號： | CN105219849B | 公開（公告）日： | 2018-08-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 劉利紅;舒陽 | 申請（專利權(quán)）人： | 南方醫(yī)科大學(xué) |
| 主分類號： | C12Q1/6858 | 分類號： | C12Q1/6858;G01N21/78 |
| 代理公司： | 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205 | 代理人： | 胡輝 |
| 地址： | 510515 廣東*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 基于 修飾 納米 dna 相互作用 比色 檢測 | ||
1.一種檢測基因點(diǎn)突變的方法，其特征在于：包括以下步驟：
1)用上游引物2與下游引物2對提取的HT29，SW480，Ec109，A549和Huh-7細(xì)胞的DNA進(jìn)行等位基因特異性擴(kuò)增，PCR條件參數(shù)如下表：
步驟1 95℃5min 1x cycle 步驟2 68℃30s 35x cycle 72℃10s 步驟3 72℃2min 1x cycle
2)取6支500μL Eppendorf微量離心管，分別記為1～6，均加入納米金溶液，然后再往1號加入5μL PCR緩沖液、2～6號分別加入5μL SW480、HT29、A549、Huh-7和Ec109的PCR產(chǎn)物，混勻后再加入NaCl，混勻觀察顏色變化；若溶液顏色保持紅色說明該樣品發(fā)生了相應(yīng)的基因點(diǎn)突變；
上述各管溶液總體積均為220μL，納米金2.46nM，NaCl 0.068M；
上述上游引物2與下游引物2的具體序列如下：
上游引物2：5′-AGGTGATTTTGGTCTAGCTACAGA-3′；
下游引物2：5′-TAGTAACTCAGCAG CATCTCAGGGC-3′；
上述方法不用于疾病的診斷和治療。
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