[發(fā)明專利]CABYR-a/b在調(diào)控YAP表達(dá)和磷酸化水平及調(diào)控p73表達(dá)中的應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201510589782.1
• 申請日: 2015-09-16
• 公開（公告）號: CN105106960A
• 公開（公告）日: 2015-12-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 肖雪媛;肖倩倩;胡恩澤;何大澄;張為慶
• 申請（專利權(quán)）人: 北京師范大學(xué)
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61K38/17;A61K48/00;A61K31/7088;A61P35/00
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;張立娜

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及CABYR-a/b在調(diào)控YAP表達(dá)和磷酸化水平及調(diào)控p73表達(dá)中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

鈣離子結(jié)合酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)蛋白(calcium-bindingtyrosinephosphorylation-regulatedprotein，CABYR)，于2002年首次在精子中發(fā)現(xiàn)，其包括6個轉(zhuǎn)錄本編碼5種蛋白亞型，包括CABYR-a,-b,-c,-d,和-e(兩個轉(zhuǎn)錄本同時編碼相同的亞型，CABYR-c)。CABYR具有睪丸特異性，其定位于精子細(xì)胞的胞質(zhì)和成熟精子的鞭毛中。根據(jù)文獻(xiàn)報道，CABYR在多種癌癥中表達(dá)，如腦癌、食管癌、肝癌和肺癌。然而關(guān)于CABYR生物學(xué)功能上的作用，只有在肝癌和肺癌中有極少的報道，如在HepG2(人肝癌細(xì)胞)中沉默CABYR-c可使細(xì)胞生長速度減慢。CABYR的生物功能有待于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)程中慢慢發(fā)掘。

Hippo通路最早在果蠅里被發(fā)現(xiàn)，在生理狀態(tài)下Hippo通路主要是調(diào)控細(xì)胞的增殖和凋亡而限定組織器官生長的大小，并參與干細(xì)胞的自我更新。近期發(fā)現(xiàn)，Hippo信號途徑是一種新的抑制腫瘤發(fā)生的信號通路，而且YAP是Hippo信號途徑的核心蛋白。在哺乳動物中，Hippo通路由4個主要的激酶調(diào)控YAP的活性。當(dāng)Hippo信號通路激活后引起Mst1/2活化，Mst1/2激酶與支架蛋白Sav1組成復(fù)合物使Lats1/2(Largetumorsuppressor；LATS)激酶磷酸化并被激活，磷酸化的Lat1/2激酶又與另一支架蛋白Mob1組成復(fù)合物。Lats1/2直接使YAP蛋白上S127被磷酸化后產(chǎn)生一個14-3-3的結(jié)合基序，從而可與胞漿中的14-3-3蛋白結(jié)合滯留在胞漿中，導(dǎo)致YAP入核減少，或者進(jìn)一步被磷酸化后通過蛋白酶體途徑被降解。由于YAP不具有DNA結(jié)合活性。因此，進(jìn)入核的非磷酸化狀態(tài)的YAP與其他轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合才能發(fā)揮其生物學(xué)作用。目前公認(rèn)的是TEAD和p73。核內(nèi)YAP與轉(zhuǎn)錄因子TEAD(TEA-domain；TEAD)結(jié)合，促進(jìn)或抑制TEAD靶基因的表達(dá)，如CTGF和Cyr61，從而調(diào)節(jié)多種生物學(xué)功能，如細(xì)胞生長、細(xì)胞接觸抑制、控制組織器官的大小和干細(xì)胞的自我更新等。YAP也可與p73結(jié)合調(diào)控與細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，如Bax和DR5等。此外也有報道，在多種腫瘤組織中發(fā)現(xiàn)核內(nèi)YAP的表達(dá)增高，這就提示YAP的活性與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。YAP的活性除了受Hippo通路調(diào)節(jié)外，近幾年也陸續(xù)報道了其他激酶也可調(diào)節(jié)YAP磷酸化活性。如胞漿中YAPS127磷酸化后可進(jìn)一步被CK1δ/ε磷酸化，并通過蛋白酶體使其降解。盡管這一領(lǐng)域正迅速發(fā)展，但有關(guān)Hippo信號途徑上游信號調(diào)控仍知之甚少。另外，除了p63可直接結(jié)合到Y(jié)AP的啟動子上抑制YAP的轉(zhuǎn)錄外，至今未見其他能調(diào)控YAPmRNA水平的報道。因此，YAP可能具有廣泛的生理和病理方面的生物學(xué)作用。

目前為止，尚未見關(guān)于CABYR與YAP之間關(guān)系的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供CABYR-a/b及其抑制劑或促進(jìn)劑的新用途。

本發(fā)明提供了CABYR蛋白抑制劑在如下(a1)-(a4)至少一種中的應(yīng)用：

(a1)抑制YAP蛋白磷酸化，和/或制備抑制YAP蛋白磷酸化的產(chǎn)品；

(a2)促進(jìn)YAP蛋白表達(dá)，和/或制備促進(jìn)YAP蛋白表達(dá)的產(chǎn)品；

(a3)促進(jìn)p73蛋白表達(dá)，和/或制備促進(jìn)p73蛋白表達(dá)的產(chǎn)品；

(a4)制備用于治療和/或預(yù)防由于YAP蛋白磷酸化水平升高和/或YAP蛋白表達(dá)降低和/或p73蛋白表達(dá)降低所致疾病的藥物。

活性成分為CABYR蛋白抑制劑，具有如下(a)-(d)功能中至少一種的產(chǎn)品也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍：

(a)抑制YAP蛋白磷酸化；

(b)促進(jìn)YAP蛋白表達(dá)；

(c)促進(jìn)p73蛋白表達(dá)；

(d)治療和/或預(yù)防由于YAP蛋白磷酸化水平升高和/或YAP蛋白表達(dá)降低和/或p73蛋白表達(dá)降低所致疾病。

本發(fā)明還提供了如下(1)-(4)所示物質(zhì)中的任一種在如下(b1)-(b4)至少一種中的應(yīng)用：

(1)CABYR蛋白；

(2)CABYR蛋白的編碼基因；

(3)含有所述編碼基因的表達(dá)盒、重組載體或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞；

(4)CABYR蛋白促進(jìn)劑：