[發明專利]一種阪崎腸桿菌顯色培養基

在審

• 申請號: 201510580890.2
• 申請日: 2015-09-14
• 公開（公告）號: CN105062934A
• 公開（公告）日: 2015-11-18
• 發明（設計）人: 劉士旺;樓堅;斯丹丹;施麗潔;周亞琴;尹學輝;方文姬;林學海;吳元鋒;黃俊
• 申請（專利權）人: 浙江科技學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種阪崎腸桿菌顯色培養基。

背景技術

阪崎腸桿菌是腸桿菌科的一種有周生鞭毛、能運動、無芽孢、兼性厭氧的革蘭陰性桿菌，以前被稱為黃色陰溝腸桿菌，1980年更名為阪崎腸桿菌。該菌是人和動物腸道中的一種正常寄生菌，但是在一定條件下會致病。1961年，兩位英國醫生Urmenyi和Franklin首次報道了兩例由阪崎腸桿菌引起的新生兒腦膜炎，隨后丹麥、美國、荷蘭、希臘、冰島、比利時等國家相繼報道了新生兒阪崎腸桿菌感染事件。新生兒感染該菌可能導致腦膜炎、壞死性小腸結腸炎和菌血癥等疾病，并可引起嚴重的神經系統后遺癥甚至死亡，感染致死率高達20%～50%，即使治愈，也容易造成神經系統性后遺癥。該菌偶爾還可引起成人局部感染、菌血癥以及骨髓炎等。阪崎腸桿菌已經被國際食品微生物標準委員會（ICMSF）稱為是嚴重危害特定人群、威脅生命或導致慢性實質性后遺癥的細菌。目前有關阪崎腸桿菌的污染來源尚不清楚。Leclercq等2002年從某些食品樣本（例如奶酪、香料、碎牛肉等）中，Hamilton等2003年從廄螫蠅中均分離出了該菌，但從已經報道的諸多新生兒感染病例報告中基本可以確定嬰兒配方奶粉是新生兒感染的主要途徑。

顯色培養基（Chromogenic/FluorogenicCultureMedia）是一類利用微生物自身代謝產生的酶與相應顯色底物反應顯色的原理來檢測微生物的新型培養基。這些相應的顯色底物是由產色基因和微生物部分可代謝物質組成，在特異性酶作用下，游離出產色基因顯示一定顏色，直接觀察菌落顏色即可對菌種作出鑒定。它是一種新型分離培養基，利用顯色培養基進行微生物的篩選分離，其反應的靈敏度和特異性大大優于傳統培養基。

傳統的阪崎腸桿菌顯色培養基中的顯色劑為4-硝基苯酚-α-D-吡喃葡萄糖苷。4-硝基苯酚-α-D-吡喃葡萄糖苷產生的4-硝基苯酚在瓊脂中很容易擴散影響實驗結果觀察，因而存在一定的局限性。此外，在TSA上加入4-甲基傘形花內酮-α-D葡萄糖苷酸（α-MUG）可鑒別阪崎腸桿菌疑似菌落，但其只能在紫外線照射條件下才能區分，且紫外線對人體有害。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明的目的在于設計提供一種阪崎腸桿菌顯色培養基的技術方案。

所述的一種阪崎腸桿菌顯色培養基，其特征在于由以下組分構成：蛋白胨10-20g/L、酵母粉5-7g/L、氯化鈉5-8g/L、檸檬酸鐵銨0.5-1.5g/L、硫代硫酸鈉0.5-1.5g/L、脫氧膽酸鈉0.5-1.52g/L、5-溴-6-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡萄糖0.01-0.25g/L、瓊脂13-20g/L，pH6.8±0.2。

所述的一種阪崎腸桿菌顯色培養基，其特征在于由以下組分構成：蛋白胨12-18g/L、酵母粉5-7g/L、氯化鈉6-7g/L、檸檬酸鐵銨0.8-1.2g/L、硫代硫酸鈉0.8-1.2g/L、脫氧膽酸鈉0.8-1.3g/L、5-溴-6-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡萄糖0.015-0.2g/L、瓊脂14-18g/L。

所述的一種阪崎腸桿菌顯色培養基，其特征在于由以下組分構成：蛋白胨20g/L、酵母粉6g/L、氯化鈉5g/L、檸檬酸鐵銨1g/L、硫代硫酸鈉1g/L、脫氧膽酸鈉1g/L、5-溴-6-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡萄糖0.1g/L、瓊脂15g/L。

本發明的積極效果：本發明培養基組方簡單，操作方便；實驗結果便于觀察，分析；提高檢測效率和準確率；與傳統培養基相比，其成本更低，利于推廣應用。

具體實施方式

以下結合實施例來進一步說明本發明。

實施例1

1、制備阪崎腸桿菌顯色培養基，該培養基配方為：蛋白胨20.0g、酵母粉6.0g、氯化鈉5.0g、檸檬酸鐵銨1.0g、硫代硫酸鈉1.0g、脫氧膽酸鈉1.0g、5-溴-6-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡萄糖0.1g、瓊脂15g、pH6.8±0.2、蒸餾水1000ml。

稱取6.0g該顯色培養基，加入150ml蒸餾水，加熱煮沸完全溶解，121℃高壓滅菌15min，冷至50℃左右時，傾入無菌平皿，備用。

2、接種：將活化后的阪崎腸桿菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、鼠傷寒沙門氏菌、蠟樣芽孢桿菌分別涂布于上述顯色培養基，37℃培養24h。

3、結果：

實施例2