[發(fā)明專利]基于細(xì)胞與微電極的相互作用實(shí)現(xiàn)單一癌細(xì)胞的檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510579095.1
• 申請(qǐng)日: 2015-09-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105510411A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-04-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭志慧;呂曉琴;李敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 陜西師范大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N27/26
• 分類號(hào): G01N27/26;G01N33/53
• 代理公司: 西安永生專利代理有限責(zé)任公司 61201
• 代理人: 曹宇飛

1.一種基于細(xì)胞與微電極的相互作用實(shí)現(xiàn)單一癌細(xì)胞的檢測(cè)方法，其特征在于由以下步驟組成：

(1)將電化學(xué)活性分子或摻雜電化學(xué)活性分子的納米粒子與能夠特定識(shí)別癌細(xì)胞的適配體DNA通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合；

(2)將待檢細(xì)胞離心后，與步驟(1)的結(jié)合電化學(xué)活性分子的適配體DNA在4℃培養(yǎng)2h后，離心，洗滌，分散在濃度為0.01mol/L、pH＝7.4的磷酸緩沖液中備用，使標(biāo)有電化學(xué)活性分子的適配體DNA與細(xì)胞表面蛋白特異性的識(shí)別；

(3)利用電化學(xué)工作站中的三電極體系進(jìn)行電化學(xué)檢測(cè)，以金微電極為工作電極、鉑電極為對(duì)電極、Ag/AgCl電極為參比電極、0.01mol/L pH＝7.4的磷酸緩沖液為電解液，將步驟(2)處理后的待檢細(xì)胞注射到電解液中，待檢細(xì)胞在電解池中自由運(yùn)動(dòng)，單一的待檢細(xì)胞與微電極表面發(fā)生碰撞，并粘附在其表面上時(shí)，待檢細(xì)胞上的電化學(xué)活性物質(zhì)能夠發(fā)生氧化反應(yīng)，則產(chǎn)生電化學(xué)信號(hào)，即可確定該單一的待檢細(xì)胞為癌細(xì)胞；若無(wú)電化學(xué)信號(hào)產(chǎn)生，則說(shuō)明該細(xì)胞非癌細(xì)胞。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于細(xì)胞與微電極的相互作用實(shí)現(xiàn)單一癌細(xì)胞的檢測(cè)方法，其特征在于：所述電化學(xué)活性分子是二茂鐵小分子、亞甲基藍(lán)或聯(lián)釕吡啶。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于細(xì)胞與微電極的相互作用實(shí)現(xiàn)單一癌細(xì)胞的檢測(cè)方法，其特征在于：所述適配體DNA是AS1411或Sgc8c，其中AS1411的序列為NH2-GGTGGTGGTGGTTGTGGTGGTGGTGG，Sgc8c的序列為NH2-ATC TAA CTG CTG CGC CGC CGG GAAAAT ACT GTA CGG TTA GA。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于細(xì)胞與微電極的相互作用實(shí)現(xiàn)單一癌細(xì)胞的檢測(cè)方法，其特征在于：所述納米粒子是單質(zhì)金屬納米粒子或無(wú)機(jī)化合物納米粒子或復(fù)合納米粒子。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的基于細(xì)胞與微電極的相互作用實(shí)現(xiàn)單一癌細(xì)胞的檢測(cè)方法，其特征在于：所述金屬納米粒子是金、鉑、鎳或銀納米粒子。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的基于細(xì)胞與微電極的相互作用實(shí)現(xiàn)單一癌細(xì)胞的檢測(cè)方法，其特征在于：所述復(fù)合納米粒子是金/鉑復(fù)合納米粒子或金/二氧化硅復(fù)合納米粒子。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的基于細(xì)胞與微電極的相互作用實(shí)現(xiàn)單一癌細(xì)胞的檢測(cè)方法，其特征在于：所述無(wú)機(jī)化合物納米粒子為二氧化硅納米粒子或碳量子點(diǎn)納米粒子或者復(fù)勒烯C60納米粒子。