[發明專利]一種嘌呤核苷磷酸化酶的制備方法及應用有效
| 申請號： | 201510575000.9 | 申請日： | 2015-09-10 |
| 公開（公告）號： | CN105087515B | 公開（公告）日： | 2018-12-04 |
| 發明（設計）人： | 陸健;孫軍勇;李玉淼 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N9/10 | 分類號： | C12N9/10;C12N15/70;C12N1/21;C12C11/00;C12C7/04 |
| 代理公司： | 北京愛普納杰專利代理事務所(特殊普通合伙) 11419 | 代理人： | 張勇 |
| 地址： | 214122 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 嘌呤 核苷 磷酸化酶 制備 方法 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種制備嘌呤核苷磷酸化酶的方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)將核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的基因，以pET28a(+)為表達載體，以大腸桿菌BL21(DE3)為宿主，構建重組菌；
(2)發酵培養重組菌制備嘌呤核苷磷酸化酶，所述發酵培養是將重組菌種子液轉接到LB/Kanr液體培養基中，37℃培養至對數生長期中期，加入異丙基-β-硫代半乳糖苷至終濃度0.05mmol/L，30℃誘導培養4-5h。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述發酵培養是將重組菌種子液，按1％接種量轉接到LB/Kanr液體培養基中，37℃培養至發酵液OD600＝0.6，加入異丙基-β-硫代半乳糖苷至終濃度為0.05mmol/L，30℃誘導4h。
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