[發明專利]一種撒瓦那柏初代組培方法

有效

• 申請號: 201510566773.0
• 申請日: 2015-09-09
• 公開（公告）號: CN105104201B
• 公開（公告）日: 2017-06-13
• 發明（設計）人: 周余華;周琴;蔣濤;王磊;于健;王紅梅
• 申請（專利權）人: 江蘇農林職業技術學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙)32204
• 代理人: 許丹丹

技術領域

本發明涉及一種撒瓦那柏初代組培方法，屬于苗木繁殖技術領域。

背景技術

撒瓦納柏是一種四季均為黃色的新引進的彩葉植物，由于枝條流線形，色彩鮮明，日本早己在園林中大量應用，而我國在園林綠化中還沒有見到。撒瓦納一般采用種子播種、扦插方法繁殖，但種子繁殖容易發生變異，扦插繁殖的穗源較少，不能快速大量繁殖，所以用組織培養的方法是撒瓦納柏快繁新途徑。

目前，在撒瓦納柏的初代組織培養過程中，培養基、激素種類和濃度都很重要，但是現有技術中的選擇都不夠合理，導致形成分枝過少，易出現玻璃花、褐化等現象。

發明內容

發明目的：為了解決上述技術問題，本發明提供一種撒瓦那柏初代組培方法。

技術方案：為了實現上述發明目的，本發明公開了一種撒瓦那柏初代組培方法，包括以下步驟：

(1)培養基的配制：選擇基礎培養基，加入蔗糖和瓊脂，再加入6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)或者萘乙酸，調節pH值，滅菌，即得；

(2)外植體處理：選擇不帶芽的外植體，清洗，消毒；

(3)接種培養：將步驟(2)所得外植體舊傷口剪去，插入步驟(1)所得培養基中，置于培養室內培養。

作為優選，所述步驟(1)中基礎培養基為MS、1/2MS(1/2MS培養基中大量元素為MS培養基的一半)、B5或者WPM培養基。

作為另一種優選，所述步驟(1)中蔗糖和瓊脂的濃度分別為30g/L和7g/L。

作為另一種優選，所述步驟(1)中6-芐氨基腺嘌呤或者萘乙酸的濃度均為0.05-1mg/L。

作為另一種優選，所述步驟(1)中pH值為5.8～6.0，滅菌條件為：121℃高壓下滅菌25min。

作為另一種優選，所述步驟(2)中清洗方法為：先用洗衣粉水溶液浸泡干凈后，再用純水沖洗2小時。

作為另一種優選，所述步驟(2)中消毒方法為：先用75％酒精處理30秒，再用0.1％的升汞浸泡5-8min，最后用無菌水沖洗5次，殘留的水分用無菌濾紙吸取。

作為另一種優選，所述步驟(3)中培養室的培養條件為：光照16h/d，光照度為2000lx，溫度控制在(25±2)℃。

技術效果：相對于現有技術，本發明方法不僅具有現有技術中組培繁殖的優勢，還通過特定的培養基、激素種類和濃度，與其它處理方法相結合，能夠顯著降低撒瓦那柏的污染率，提高其成活率，使撒瓦納柏能順利形成更多分枝，不會出現玻璃化、褐化等現象。

附圖說明

圖1為不同的培養基對初代培養效果的影響；

圖2為不同濃度的6-BA對初代培養效果的影響(橫坐標中1、2、3、4分別為0mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、1mg/L)；

圖3為不同濃度的NAA對初代培養效果的影響(橫坐標中1、2、3、4分別為0mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、1mg/L)；

具體實施方式

實施例1

(1)培養基的配制：選擇MS培養基作為基礎培養基，加入蔗糖和瓊脂，濃度分別為30g/L和7g/L，再加入6-芐氨基腺嘌呤(6-BA)，其濃度為0.05mg/L，調節pH值為5.8～6.0，121℃高壓下滅菌25min，即得；

(2)外植體處理：選擇不帶芽的外植體，先用洗衣粉水溶液浸泡干凈后，再用純水沖洗2小時，然后用75％酒精處理30秒，再用0.1％的升汞浸泡5min，最后用無菌水沖洗5次，殘留的水分用無菌濾紙吸取；

(3)接種培養：將步驟(2)所得外植體舊傷口剪去，插入步驟(1)所得培養基中，置于培養室內培養，培養條件為：光照16h/d，光照度為2000lx，溫度控制在(25±2)℃。

實施例2：

(1)培養基的配制：選擇B5培養基作為基礎培養基，加入蔗糖和瓊脂，濃度分別為30g/L和7g/L，再加入6-芐氨基腺嘌呤，其濃度為1mg/L，調節pH值為5.8～6.0，121℃高壓下滅菌25min，即得；

(2)外植體處理：選擇不帶芽的外植體，先用洗衣粉水溶液浸泡干凈后，再用純水沖洗2小時，然后用75％酒精處理30秒，再用0.1％的升汞浸泡8min，最后用無菌水沖洗5次，殘留的水分用無菌濾紙吸取；

(3)接種培養：將步驟(2)所得外植體舊傷口剪去，插入步驟(1)所得培養基中，置于培養室內培養，培養條件為：光照16h/d，光照度為2000lx，溫度控制在(25±2)℃。

實施例3：