[發明專利]一種改良的煙草花粉活力檢測方法

有效

• 申請號: 201510564900.3
• 申請日: 2015-09-08
• 公開（公告）號: CN105112490B
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 馬文廣;鄭昀曄;索文龍;牛永志;禹曉梅;楊曉東;鄧盛斌
• 申請（專利權）人: 玉溪中煙種子有限責任公司;云南省煙草農業科學研究院
• 主分類號: C12Q1/02
• 分類號: C12Q1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一種改良的煙草花粉活力檢測方法，具體包括以下步驟：在每1 ml煙草種子油脂加入60~100 mg煙草花粉混合均勻；將加熱后的固體培養基用載玻片薄層涂布于載玻片上；用移液槍吸取10 μl的含有煙草花粉的煙草種子油脂，置于冷卻的固體培養基上，用玻璃棒均勻涂布；把載玻片放置于加兩層濕潤濾紙的培養皿中，然后把培養皿放入培養箱中25℃下暗培養，4h后顯微鏡下觀察花粉萌發情況，統計花粉活力。本發明花粉在煙草種子油脂中分散性好，涂布于固體培養基上花粉不疊加，便于計數和統計花粉活力；煙草種子油脂可促進花粉萌發，縮短了花粉活力檢測的時間，提高花粉活力檢測效率。

技術領域

本發明屬于植物花粉活力研究技術領域，具體涉及一種能提高煙草花粉分散性，縮短花粉萌發時間的煙草花粉活力檢測方法。

背景技術

在煙草雜交育種或制種中，通常需要提前采集父本花粉，經過一段時間貯藏，在花粉使用前，進行花粉活力檢測，以檢驗花粉的萌發受精能力，從而為煙草雜交育種和制種提供科學依據。目前煙草花粉活力檢測方法主要有花粉染色法、花粉授粉結實法、花粉離體萌發法等。花粉染色法簡便快捷，但由于能使未成熟和衰老的花粉著色，而這些花粉不一定具有受精能力，致使花粉活力測定值偏高，花粉活力測定結果不準確；花粉授粉結實法是根據結實情況判斷花粉活力，結果比較準確，但由于授粉到柱頭上的花粉量多，無法定量判斷花粉活力，同時需要的時間較長；花粉離體萌發法是較為理想的檢測煙草花粉活力的方法，測定結果較為穩定，更能反應花粉活力的實際狀況，該方法是將花粉散落在固體或者液體培養基中進行花粉活力檢測，煙草上采用固體培養基檢測花粉活力時經常會遇到花粉易疊加聚集，花粉粒計數及活力統計困難的問題；采用液體培養基檢測花粉活力，花粉分散性較好，但花粉萌發需要的時間較長。如何同時提高花粉分散性，縮短花粉萌發時間是花粉活力檢測工作中亟待解決的問題。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種簡單、快速、可靠的改良煙草花粉活力檢測方法，在提高花粉分散性的同時縮短花粉萌發時間，提高花粉活力檢測效率。

本發明的目的通過以下技術方案予以實現。

一種改良的煙草花粉活力檢測方法，先將煙草花粉分均勻散于煙草種子油脂中，煙草種子油脂中煙草花粉的含量為60~100 mg/ml，然后吸取含有煙草花粉的煙草種子油脂，涂布于培養基上，培養后觀察花粉萌發情況，進行活力統計。

上述改良的煙草花粉活力檢測方法，具體包括以下步驟：

（1）按照每1 ml煙草種子油脂加入60~100 mg煙草花粉的量，稱取煙草花粉，加入到煙草種子油脂中，混合均勻；

（2）配制固體培養基，將加熱后的固體培養基用載玻片薄層涂布于載玻片上；

（3）用移液槍吸取10 μl的含有煙草花粉的煙草種子油脂，置于冷卻的固體培養基上，用玻璃棒均勻涂布；

（4）把載玻片放置于加兩層濕潤濾紙的培養皿中，然后把培養皿放入培養箱中25℃下暗培養，4h后顯微鏡下觀察花粉萌發情況，統計花粉活力。

經過大量實驗證明，本發明具有以下突出優點：

1、花粉在煙草種子油脂中分散性好，涂布于固體培養基上花粉不疊加，便于計數和統計花粉活力；

2、煙草種子油脂可促進花粉萌發，縮短了花粉活力檢測的時間，提高花粉活力檢測效率。

具體實施方式

實施例1