[發(fā)明專利]一種取代脲類除草劑殘留降解菌株及其生產(chǎn)的菌劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510564529.0
• 申請日: 2015-09-07
• 公開（公告）號: CN105132325B
• 公開（公告）日: 2018-03-09
• 發(fā)明（設計）人: 蔣建東;張龍;杜方嶺;周慶新;王軍華;陳凱;李順鵬
• 申請（專利權）人: 南京農(nóng)業(yè)大學;山東省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)產(chǎn)品研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;C12R1/01
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司32218
• 代理人: 傅婷婷,徐冬濤

技術領域

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)微生物領域，涉及一種取代脲類除草劑殘留降解菌株及其生產(chǎn)的菌劑。

技術背景

化學農(nóng)藥的廣泛使用大大地促進了現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的發(fā)展，為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)挽回了大量因病蟲草害等原因造成的損失，并極大地提高了農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的勞動效率和機械化程度，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的現(xiàn)代化進程中起了不可估量的作用。但同時農(nóng)藥都是一些有毒有害化學物質(zhì)，它們進入生態(tài)環(huán)境后，不僅殺死了對人類有害的生物，同時也對生態(tài)系統(tǒng)造成了嚴重的危害。農(nóng)藥的大量使用引起農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留超標，嚴重影響了人民的身體健康。隨著人們生活水平的提高和環(huán)境保護意識的增強，全社會對農(nóng)藥殘留帶來的直接危害和潛在影響亦愈來愈關注，人們迫切需要無農(nóng)藥殘留污染的清潔的綠色農(nóng)產(chǎn)品。

取代脲類除草劑已經(jīng)被商業(yè)化生產(chǎn)超過50年，成為了全世界廣泛使用的最重要的除草劑之一。由于其廣泛重復的使用以及相對較高的水溶性，在各種污染的生境和農(nóng)副產(chǎn)品中經(jīng)常被檢測到。全國每年發(fā)生多起農(nóng)藥中毒、甚至死亡的事故，七成與農(nóng)藥殘留有關。值得注意的是一些大市場賣出去的農(nóng)副產(chǎn)品農(nóng)藥殘留嚴重，直接危害城鄉(xiāng)居民的身體健康和生命安全，不少農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)基地因其產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留超標影響銷售和出口。另外由于部分農(nóng)戶的不規(guī)范使用，也造成了農(nóng)藥在環(huán)境中的廣泛殘留。因此農(nóng)藥殘留已經(jīng)成為食品安全與生態(tài)環(huán)境保護中首當其沖、急待解決的問題。

取代脲類除草劑本身及其代謝產(chǎn)物被證明對微生物、植物、動物、及人類都有毒害作用。因此，取代脲類除草劑在環(huán)境中的吸附、遷移、和分解也備受關注。由于農(nóng)藥殘留污染一般屬于面源污染，具有廣泛性和頑固性，一般方法很難將其徹底清除。然而，實驗室和實際應用研究都表明利用微生物來降解消除土壤中的農(nóng)藥殘留“庫”容量，從而降低糧食、蔬菜、茶葉等農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留，提高農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)和經(jīng)濟價值是可行的。而且微生物數(shù)量大、種類多，其降解有機物的潛力是相當大的，幾乎所有能造成環(huán)境污染的有機物都能被微生物所分解、利用，而且干凈徹底、無二次污染。利用微生物的新陳代謝作用，對易殘留的農(nóng)藥進行轉(zhuǎn)化，使其無毒化，也是目前研究的熱點。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于針對生產(chǎn)實踐中的實際問題和需求，篩選一株新的農(nóng)藥殘留降解菌。

本發(fā)明的另一目的是提供該降解菌的應用。

本發(fā)明的又一目的是提供該降解菌生產(chǎn)的菌劑。

本發(fā)明的目的可通過如下技術方案實現(xiàn)：

本發(fā)明提供一種高效降解取代脲類除草劑的菌株。該菌株是一株革蘭氏染色反應陰性菌LR2014-1，2015年04月15日寄存于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,菌種保藏號為CCTCC M 2015236。經(jīng)鑒定屬于Diaphorobacter sp.。菌株LR2014-1的形態(tài)學特征為：在LB平板上呈淡黃色菌落，菌落凸起，表面濕潤光滑，邊緣整齊，不透明(圖1A)。主要生物學特性為：G^－，菌體為桿狀，大小約0.7μm寬,1.8μm長，無鞭毛(圖1B)，好氧；過氧化氫酶、氧化酶和V.P.反應為陽性；吲哚反應陰性；不能水解淀粉，氧化葡萄糖產(chǎn)酸，使石蕊牛乳酸凝固。在利谷隆農(nóng)藥平板上能形成透明的降解圈(圖1C)。菌株LR2014-1能將利谷隆、敵草隆降解為3,4-二氯苯胺。最適降解底物為利谷隆，在實驗室搖瓶培養(yǎng)條件下利谷隆的降解率達99％以上(圖2)。該菌可以用發(fā)酵工業(yè)通用發(fā)酵設備進行生產(chǎn)。

本發(fā)明所述的取代脲類除草劑降解菌株LR2014-1在降解取代脲類除草劑中的應用，優(yōu)選在降解土壤中取代脲類除草劑中的應用。

其中，所述的取代脲類除草劑優(yōu)選利谷隆、敵草隆或綠麥隆，進一步優(yōu)選利谷隆。

本發(fā)明所述的取代脲類除草劑降解菌株LR2014-1在制備降解取代脲類除草劑的降解菌劑中的應用，優(yōu)選在制備降解土壤中取代脲類除草劑的降解菌劑中的應用。

其中，所述的取代脲類除草劑優(yōu)選利谷隆、敵草隆或綠麥隆，進一步優(yōu)選利谷隆。

一種用本發(fā)明所述的除草劑降解菌株LR2014‐1生產(chǎn)的取代脲類除草劑殘留降解菌劑。

所述的降解菌劑優(yōu)選通過以下工藝制備得到:斜面種－搖瓶種－種子罐－生產(chǎn)罐－產(chǎn)品(包裝劑型為液體菌劑或固體吸附菌劑)。

所述的降解菌劑進一步優(yōu)選通過以下步驟制備得到：

1)將取代脲類除草劑殘留降解菌LR2014-1的試管種接種于LB培養(yǎng)基搖瓶中，振蕩培養(yǎng)至對數(shù)期；