[發明專利]大白花杜鵑無菌苗菌根化技術

在審

• 申請號: 201510550819.X
• 申請日: 2015-09-01
• 公開（公告）號: CN105075632A
• 公開（公告）日: 2015-11-25
• 發明（設計）人: 李奮勇;田偉;張長芹;劉國強
• 申請（專利權）人: 大理蒼山植物園生物科技有限公司
• 主分類號: A01G1/00
• 分類號: A01G1/00;A01G1/04;A01C1/08
• 代理公司: 昆明今威專利商標代理有限公司 53115
• 代理人: 賽曉剛

技術領域：

本發明涉及一種大白花杜鵑(Rhododendrondecorum)無菌苗菌根化方法，特別是一種將大白花杜鵑和真菌共培養形成菌根苗的方法。，屬于植物和真菌共生形成菌根的生物技術領域。

背景技術：

大白花杜鵑(Rhododendrondecorum)屬于杜鵑花科杜鵑花屬植物。其樹姿優美，花色潔白，味清香，集觀賞與食用價值于一身，在杜鵑花栽培過程中，杜鵑花極易因根系不發達而導致植株死亡，所以在引種馴化和產業化過程中，杜鵑花由于根系差而影響營養生長和株型，導致質量下降的情況屢見不鮮。

發明內容：

本發明的目的是提供大白花杜鵑(Rhododendrondecorum)無菌苗菌根化方法，使之形成發達根系，提高植株成活率，保證在栽培過程中植株能夠正常生長，為提高杜鵑花商品質量提供理論指導和技術支撐。

為了實現本發明的目的，本發明提供了如下的技術方案：

大白花杜鵑無菌苗菌根化技術，其特征在于先選取大白花杜鵑的種子進行無菌苗的培育，再接種菌粒的培養，最后加入菌粒和杜鵑類接種菌劑建立一個共培養體系，用于菌根苗的合成。，

取健康、飽滿的大白花杜鵑種子先用無菌水沖洗后，再采用0.1％升汞溶液進行表面消毒3-5分鐘，然后無菌水沖洗7-8遍，放入滅菌的培養皿中進行萌發。

從已純化的菌種中挑取的菌絲加入液體真菌培養基中，養基為馬鈴薯葡萄糖培養基(PDA)：200g/l去皮馬鈴薯+20g/l葡萄糖+3g/l磷酸二氫鉀+1.5g/l硫酸鎂+10mg/l維生素B₁，pH5.8；封口后放于國產回旋振蕩器HY-5中，在黑暗，21-25℃條件下培養一個月得到用于接種的菌粒。

待無菌苗發芽長出兩片真葉后，無菌條件下將其移栽至裝有0.5％水瓊脂的培養瓶中，然后加入菌粒，同時倒入液體真菌培養基，pH自然，培育菌根苗合成，培養菌根苗合成10天后，即可取小苗根系觀察菌根的形成情況。

所述種子發芽、接種菌劑培養及菌根苗合成的溫度為20-25℃，濕度30-45％，光照條件為自然光2000-2500LUX+人工輔助光1500-2000LUX。

一種大白花杜鵑無菌苗菌根化技術組培繁殖及菌根苗合成方法，其特征在于選取健康、飽滿的大白花杜鵑種子，先用無菌水沖洗后，再采用0.1％升汞溶液進行表面消毒3-5分鐘，然后無菌水沖洗7-8遍，放入滅菌的培養皿中進行萌發；

從已純化的菌種中挑取一定量的菌絲加入液體真菌培養基中，封口后放于國產回旋振蕩器HY-5中，在黑暗，21-25℃條件下培養一個月得到用于接種的菌粒；

待無菌苗發芽長出兩片真葉后，無菌條件下將其移栽至裝有0.5％水瓊脂的培養瓶中，然后加入菌粒，同時倒入少量液體真菌培養基，從而建立了一套完整的共培養體系，用于合成菌根苗；培養10天后即可取小苗根系來觀察菌根的形成情況。

本發明技術方案的提出是基于下述的研究基礎：大白花杜鵑具很高的觀賞和食用價值。杜鵑花為須根系，在栽培過程中極易因根系不發達影響營養生長和株型，導致質量下降甚至植株死亡。但是杜鵑花在生長過程中會與真菌形成一種互惠共生體，即菌根。菌根可以促進杜鵑花對水和營養物質的吸收，從而增強植物生存競爭的能力和耐性，使植物在惡劣條件下仍能存活。為提高杜鵑花引種馴化的成功率，培養出根系發達的高品質商品，推動我國花卉產業的發展，需要進行大白花杜鵑和真菌的菌根合成培養實驗，摸索出合適的培養條件，并形成一套專門的菌根合成技術體系。

由于大白花杜鵑花種子苗的根系生長初期較細弱，易導致吸收水分和營養的能力不佳，本發明的優點在于：

1.通過接種菌根真菌，使幼苗根系發達，促進水分和營養吸收，為營養生長奠定良好的基礎。

2.菌根苗在生存競爭能力和耐性方面遠優于未形成菌根的植株，從而保證了植株的正常生長。

3.菌根苗的營養生長得到改善，可以極大地提高杜鵑花作為商品的質量和價格，為花卉產業化提供理論依據和技術支持。

本發明試驗程序簡便易行，杜鵑花無菌種子苗接種菌根真菌后，最快的在第5天即可培養出菌根苗，一個月后90％以上的杜鵑花苗根系可以形成菌根，極大地提高了幼苗菌根化的程度，增強了幼苗吸收營養水分的能力和惡劣條件下的耐性，為其健康生長提供了保證。

具體實施方式：