[發明專利]一種電荷修飾乳鐵蛋白的制備方法

在審

• 申請號: 201510539121.8
• 申請日: 2015-08-27
• 公開（公告）號: CN105031626A
• 公開（公告）日: 2015-11-11
• 發明（設計）人: 蒲曉輝;徐天宏;李建業;董亞琴;韋勇
• 申請（專利權）人: 南京拉克森生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: A61K38/40
• 分類號: A61K38/40;A61P31/20;A61P31/04;A61P15/00;A61P35/00;A61K31/731
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技術領域

本發明涉及抗癌藥物制取領域，具體涉及一種電荷修飾乳鐵蛋白的制備方法。

背景技術

宮頸癌，是我國總癌癥發病率的第四位，女性惡性腫瘤發病和死亡率的第二位，研究發現在99.7%左右宮頸癌患者中可檢測到HPV，其中高危型HPV與宮頸癌密切相關。每年全球有超過50萬新發宮頸癌病例，超過20萬女性死于宮頸癌。中國每年有近10萬宮頸癌新發病例，占了世界新發病例總數的將近20%。宮頸癌是第一個由世界衛生組織(WHO)確認的完全由HPV感染所引起的癌癥。HPV屬乳多空病毒科A亞群內的一組DNA病毒，為20面體立體的病毒，無包膜，直徑45～55mm，相對分子質量為5×10⁶。該病毒常存在于人體各部，為嗜上皮性病毒。目前已分出100余種HPV的DNA，其中30多種與宮頸感染和病變有關。根據其致病力的大小分為高危型和低危型兩種，其中HPV6、11、40、42、43、44、54、61、70、72、81、108等12種歸為低危型，主要引起生殖道肛周皮膚和陰道下部的外生性濕疣類病變、扁平濕疣類病變和低度子宮頸上皮內瘤樣變(CINⅠ),多呈一過性，可自然逆轉；高危型主要為HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73、82等15種，主要導致CINⅡ-Ⅲ級病變和宮頸癌的發生,持續高危型HPV感染的CINⅠ級易進展為CINⅡ-Ⅲ。高危型HPV與CINⅢ和宮頸癌有關，是導致宮頸癌的主要原因，其中高危型HPV16和18與宮頸癌的發生相關性最強。

HPV廣泛存在于自然界，人的皮膚、消化道、呼吸道等都攜帶有HPV。凡是有性生活的女性，都可能通過性接觸感染HPV，有70-80%的女性在一生中至少一次會感染HPV。人類的各種癌癥由于病因復雜，目前科學技術難以有效預防及時發現，并早期治療，而宮頸癌是目前唯一能夠確定病因是因為感染HPV病毒而發病，因而是所有癌癥中，唯一能有效預防、及時發現、并能早期治療的癌癥。國際上以HPV為靶標的宮頸癌疫苗研究為主，部分疫苗已完成I/II期臨床試驗，準備進行更深入的研究，但臨床應用尚有諸多問題，如臨床副作用和對環境的安全性，HPV病毒的嚴格種屬特異性，無法建立動物模型評價疫苗的免疫效果以及疫苗自身的安全性問題等，影響其研究進程。國內HPV疫苗還在起步階段，大部分研究集中于中藥制劑的開發。但由于檢測手段的限制，HPV的檢測采用的是組織病理學、陰道鏡學或PCR等方法，尚未運用到HC2（HPVDNA第二代雜交捕獲檢測技術），且未能對其進行定量研究。

目前，國際國內都傾注了極大的熱情在研發新型的對多種HPV毒株都具有預防及控制效應的藥物及生物制劑上，但是一直沒有突破性的進展。在國際上能有效預防和控制HPV病毒感染的藥物還相對缺乏，而在治療上由于沒有特效藥因而采用的免疫調節藥物由于普遍存在無法有效地預防HPV感染、療效不明確、價格昂貴等方面的缺陷而大大控制了其在臨床上的使用，特別是在低收入的發展中國家。

發明內容

本發明的首要目的就是提供一種電荷修飾的乳鐵蛋白與卡拉膠組合藥物及其制備方法，其能夠預防和治療女性人乳頭瘤病毒感染，以及預防和治療女性婦科革蘭氏陰性細菌感染。

為實現上述目的，本發明采用如下技術方案進行實施：

一種電荷修飾的乳鐵蛋白與卡拉膠組合藥物，包括0.01重量份的LK蛋白(電荷修飾的乳鐵蛋白)、1.5重量份的卡拉膠、5重量份的卡波姆、50重量份的甘油、0.1重量份的尼泊金乙酯。該組合藥物為凝膠劑、栓劑、敷料中一種。

一種電荷修飾的乳鐵蛋白與卡拉膠組合藥物的制備方法，包括如下操作步驟：

S1：按照配比稱取各原料，將0.5g卡波姆在80℃的水中攪拌至充分溶脹，并加0.15g卡拉膠（硒化卡拉膠），攪拌至完全溶解，趁熱經0.22μm膜過濾滅菌，得1號溶液；

S2：將0.01g尼泊金乙酯溶解于水中，再加入5g甘油，經0.22μm膜過濾滅菌，得2號溶液；

S3：將2號溶液在攪拌條件下加至1號溶液中混勻，加入0.8g三乙醇胺，調pH至5.5，得3號溶液；

S4：常溫下低速攪拌將0.001gLK蛋白(購自于進口的荷蘭DWM分司或者實施例1中制取得到)溶于適量水中，經0.22μm膜過濾滅菌，得4號溶液；

S5：在一定溫度攪拌下，將4號溶液加入3號溶液中混勻，用已滅菌的三乙醇胺溶液調pH至5.5；

S6：最后加水至100g攪勻即得組合藥物，組合藥物為凝膠劑。