[發明專利]一種用于血型抗體檢測的試劑盒及其應用

有效

• 申請號: 201510536680.3
• 申請日: 2015-08-27
• 公開（公告）號: CN105137096B
• 公開（公告）日: 2018-06-08
• 發明（設計）人: 汪德清;楊璐
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍總醫院
• 主分類號: G01N33/80
• 分類號: G01N33/80
• 代理公司: 北京中濟緯天專利代理有限公司 11429
• 代理人: 張曉霞

本發明提供了一種用于血型抗體鑒定和/或檢測的試劑盒，包括：固定有血型抗原的固相載體、補體、酶標記的抗補體、顯色液，以及采用上述試劑盒進行血型抗體鑒定和/或檢測方法。本發明所述的用于血型抗體鑒定和/或檢測的試劑盒保存周期長，儲存方便，增加了血型抗體檢測的便利性，同時本發明所述的血型抗體鑒定和/或檢測方法可以定量的檢測血液中存在的抗體，實現了血液中弱抗體的檢測，避免了現有檢測方法中肉眼判斷可能造成的人為誤差，提高了檢測的準確性和重現性，保證了輸血安全，并且能夠實現用十系及以上譜細胞進行不規則抗體的自動化和批量化檢測。

技術領域

本發明屬于血型抗體檢測和鑒定技術領域，具體涉及一種用于血型抗體檢測的試劑盒及其在血型抗體檢測中的應用。

背景技術

血型鑒定在輸血治療中非常重要，血型鑒定是基于抗原-抗體反應導致的細胞凝集反應。使用紅細胞表面抗原檢測血清/血漿中的血型抗體稱之為反定型。在臨床輸血中，必須保證正、反定型法鑒定結果一致，才能確保輸血的安全性。目前大多數的反定型試驗都是以有活力的紅細胞表面抗原作為標準抗原，然而新鮮紅細胞不易保存，并且紅細胞表面抗原的抗原性隨保存時間延長而逐漸降低。這類試劑不僅需要低溫保存，且最長保存期只有3至6個月。

現有技術中所建立的紅細胞抗體檢測方法有試管法、紙片法、微柱凝集檢測卡法等。微柱凝集法是目前最常用的檢測方法，實驗時紅細胞抗原與相應抗體的反應在微柱凝集介質中進行，微柱凝集具有分子篩的作用，如果紅細胞抗原與相應抗體結合，形成的凝集塊經離心后不能通過分子篩而留在凝集介質的上層；如果紅細胞與抗體沒有結合，反應后沒有形成凝集塊，則離心后紅細胞可以通過分子篩沉淀到底部，從而達到鑒定ABO血型的目的。但是該方法干擾因素多，可能產生假陰性或假陽性檢測結果，導致檢測結果容易出現誤差。

CN103487590B公開了一種血型抗體的間接Dot-ELISA檢測方法與應用，所述方法為將硝酸纖維素膜固定于96孔板上，然后直接將紅細胞膜包被硝酸纖維素膜上，與待測抗體反應，通過酶標二抗形成抗原-抗體復合物。然而該方法操作復雜，不易實現，需肉眼判斷檢測結果，易產生誤差且無法實現定量檢測。

CN1032926A同樣公開了將已用酶標記的ABH單克隆抗體用斑點ELISA(酶聯免疫吸附法)進行ABO血型測定，通過結合在抗體上的酶作用底物出現顏色變化來判斷血型。同樣的，上述方法也需通過肉眼觀察顏色判斷檢測結果，易產生誤差并無法實現定量檢測。

A sandwich enzyme-linked immune-sorbent assay for ABO blood typing ofsemen by using anli-P84 monoclonal antibody as a marker of blood groupsubstance in semen(Sato I et al.，J Forensic Sci，2000，45(4)：795)公開了利用ELISA法測定精液中的血型物質P84，實驗利用抗血型物質P84的單克隆抗體包板，捕捉精液或精斑樣本中的相應抗原，實驗證明即使樣本在40℃下保存8個月，樣本中仍有超過60％的P84血型物質生物學活性存在，仍然可以用這種辦法順利進行血型物質的鑒定。

為克服現有技術的缺陷，本發明提供了一種用于血型抗體鑒定和/或檢測的試劑盒及應用。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種血型抗體鑒定和/或檢測方法，解決了現有檢測方法中只能定性或半定量檢測血液中血型抗體的缺陷，實現了對血型抗體特別是血液中存在的弱抗體定量鑒定和/或檢測，提高了輸血的安全性。

本發明的另一個目的是提供一種血型抗體鑒定和/或檢測方法，解決了現有檢測方法中操作繁瑣復雜的問題，能夠實現用十系及以上譜細胞進行不規則抗體的自動化和批量化檢測。

本發明的再一個目的是提供一種用于血型抗體鑒定和/或檢測的試劑盒，解決了現有檢測產品中紅細胞保存周期過短，檢測重現性差、不能實現檢測標準化的問題。