[發(fā)明專利]膠原蛋白勻漿消化方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510533716.2
• 申請日: 2015-08-27
• 公開（公告）號: CN105063147A
• 公開（公告）日: 2015-11-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊中萬;彭天驥;張鷹;黃海軍;田會全;劉建軍;孫淑娟;陳云聲
• 申請（專利權(quán)）人: 長春博泰醫(yī)藥生物技術(shù)有限責(zé)任公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 吉林長春新紀(jì)元專利代理有限責(zé)任公司 22100
• 代理人: 白冬冬

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

現(xiàn)有膠原蛋白的生產(chǎn)初期，均需要對動物皮、骨骼等進(jìn)行細(xì)化處理，為了后期生產(chǎn)膠原蛋白的含量和純度，前期的處理極其關(guān)鍵，目前常規(guī)對動物皮中提取膠原蛋白的處理方法比較簡單，僅僅是將動物皮絞碎，制作成糊狀，簡單去雜即進(jìn)行膠原蛋白的提取，此種方法運用到膠原蛋白的生產(chǎn)中，不但造成極大的浪費，而且排雜不徹底，最終可能有許多雜質(zhì)混入膠原蛋白中。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供通過精細(xì)工藝，將動物皮進(jìn)行絞碎后進(jìn)行詳細(xì)的消化處理，用于后續(xù)提取更加高純度膠原蛋白的膠原蛋白勻漿消化方法。

本發(fā)明的步驟是：

a、把成糊狀的絞碎皮顆粒用小鐵勺轉(zhuǎn)移到組織搗碎機(jī)的玻璃杯中3勺，約50毫升，加入10倍體積的超純水，按組織搗碎機(jī)的操作規(guī)程勻漿3次，至完全懸浮，將組織勻漿轉(zhuǎn)入塑料桶；

b、所有組織顆粒絞碎均勻后將塑料桶加入超純水至組織的含量為25克／升，混勻；

c、加冰醋酸至組織懸浮液塑料桶調(diào)制溶液濃度0.5毫克/毫升；

d、稱取胃蛋白酶，將胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液，然后轉(zhuǎn)入到組織勻漿液至0.1mg/ml，即每100ml勻漿中加入1ml的胃蛋白酶溶液，混勻，室溫消化7-10天。

本發(fā)明工藝簡單，操作容易，本發(fā)明不但去除了膠原蛋白生產(chǎn)前期多余的雜質(zhì)，而且進(jìn)一步對絞碎動物皮進(jìn)行更加完美的搗碎勻漿，制作出的勻漿液為后期膠原蛋白的生產(chǎn)提供高純度保證。

具體實施方式、

本發(fā)明的步驟是：

a、把成糊狀的絞碎皮顆粒用小鐵勺轉(zhuǎn)移到組織搗碎機(jī)的玻璃杯中3勺，約50毫升，加入10倍體積的超純水，按組織搗碎機(jī)的操作規(guī)程勻漿3次，至完全懸浮，將組織勻漿轉(zhuǎn)入塑料桶；

成糊狀的絞碎皮顆粒是現(xiàn)有常規(guī)工藝簡單將動物皮絞碎工藝而成，本發(fā)明的工作是在此基礎(chǔ)上繼續(xù)進(jìn)行搗碎去雜工作；經(jīng)過此步的反復(fù)搗碎，將皮顆粒稀釋并完全懸浮與液體中；

b、所有組織顆粒絞碎均勻后將塑料桶加入超純水至組織的含量為25克／升，混勻；經(jīng)過搗碎后，繼續(xù)稀釋；

c、加冰醋酸至組織懸浮液塑料桶調(diào)制溶液濃度0.5毫克/毫升；通過加入冰醋酸調(diào)節(jié)溶液的酸性，使其pH值至2.0~3.0；

d、稱取胃蛋白酶，將胃蛋白酶溶于0.5M醋酸中制成10mg/ml的胃蛋白酶溶液，然后轉(zhuǎn)入到組織勻漿液至0.1mg/ml，即每100ml勻漿中加入1ml的胃蛋白酶溶液，混勻，室溫消化7-10天。胃蛋白酶溶液加入到上面調(diào)好的組織懸浮液中，能夠?qū)⒆匀蝗菪Y(jié)構(gòu)形態(tài)的膠原纖維消化成分子量30萬左右的膠原蛋白分子，同時切除膠原蛋白分子的氨基和羧基末端（末端肽）的球狀區(qū)域，并保持了膠原蛋白天然的空間螺旋區(qū)段結(jié)構(gòu)和生物活性，從而去除了膠原蛋白的潛在免疫源性。