[發明專利]二乙氨乙基化葡聚糖修飾以瓊脂糖凝膠為基礎的色譜介質及制備方法和應用

有效

• 申請號: 201510533005.5
• 申請日: 2015-08-27
• 公開（公告）號: CN105195115B
• 公開（公告）日: 2017-09-19
• 發明（設計）人: 余林玲;白姝;龔玲莉;孫彥
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: B01J20/291
• 分類號: B01J20/291;B01J20/286;B01J20/26;B01J20/30;C08B37/12;C08B37/02;C07K1/22
• 代理公司: 天津市北洋有限責任專利代理事務所12201
• 代理人: 王麗

1.二乙氨乙基化葡聚糖(DEAE Dextran)修飾以瓊脂糖凝膠為基礎的色譜介質，其特征是在瓊脂糖凝膠為基礎的顆粒表面通過引進環氧基間隔臂進而修飾DEAE Dextran；結構式如下：

2.如權利要求1所述的色譜介質，其特征是DEAE Dextran的分子量為300-500kDa。

3.如權利要求1所述的二乙氨乙基化葡聚糖(DEAE Dextran)修飾以瓊脂糖凝膠為基礎的色譜介質，其特征是結構式(Ⅰ)的色譜介質的制備方法是：利用環氧氯丙烷活化法在瓊脂糖凝膠為基礎的顆粒表面引進環氧基間隔臂，然后在平均環氧基密度大于40mmol/L的瓊脂糖凝膠介質中加入等體積的DEAE Dextran溶液，使DEAE Dextran充分擴散到介質孔道內；然后向介質懸浮液中加入氫氧化鈉溶液，置于恒溫水浴搖床中反應；反應產物經去離子水反復沖洗至中性后，用硼氫化鈉溶液還原瓊脂糖凝膠介質表面殘留的環氧基，還原后的瓊脂糖凝膠介質再次用去離子水反復沖洗，得到結構式(Ⅰ)的瓊脂糖表面修飾DEAE Dextran介質。

4.如權利要求3所述的色譜介質，其特征是所述的DEAE Dextran溶液濃度為200-600mg/mL；置于20-35℃的恒溫水浴搖床中，120-200rpm攪拌混合1-12h，使DEAE Dextran充分擴散到介質孔道內。

5.如權利要求3所述的色譜介質，其特征是所述的氫氧化鈉溶液濃度為0.1-2mol/L，氫氧化鈉溶液體積用量為活化的瓊脂糖凝膠介質體積量的0.1-2倍，置于20-35℃恒溫水浴搖床中，120-200rpm下反應12-60h。

6.如權利要求3所述的色譜介質，其特征是所述的硼氫化鈉溶液濃度為0.3g/L-1g/L。

7.如權利要求1所述的二乙氨乙基化葡聚糖(DEAE Dextran)修飾以瓊脂糖凝膠為基礎的色譜介質，其特征是結構式(Ⅱ)色譜介質的制備方法是：在瓊脂糖凝膠表面偶聯二乙氨乙基，利用環氧氯丙烷活化法在以表面偶聯二乙氨乙基的瓊脂糖凝膠為基礎的顆粒表面引進環氧基間隔臂，然后方法與權利要求3的方法相同，得到結構式(Ⅱ)的在瓊脂糖凝膠為基礎的表面修飾DEAE Dextran介質。

8.如權利要求7所述的色譜介質，其特征是偶聯DEAE的瓊脂糖凝膠介質的DEAE密度為30-103mmol/L。

9.如權利要求1所述的二乙氨乙基化葡聚糖修飾以瓊脂糖凝膠為基礎的色譜介質應用于蛋白質高效分離純化中，提升蛋白質的吸附容量和吸附速率。