[發明專利]一種小麥溫光敏型不育系轉育方法

有效

• 申請號: 201510526943.2
• 申請日: 2015-08-25
• 公開（公告）號: CN105075851B
• 公開（公告）日: 2018-03-06
• 發明（設計）人: 李東升;陳愛大;溫明星;曲朝喜;蔡金華
• 申請（專利權）人: 江蘇丘陵地區鎮江農業科學研究所
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/04;A01G22/20
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產權代理有限公司11246
• 代理人: 龔燮英

1.一種小麥溫光敏型不育系轉育方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)以不育系親本材料K78S作為母本，鎮09196作為父本，兩者進行有性雜交，并以鎮09196作為輪回親本，進行5輪輪回選育；

2)對F5代進行播期鑒定，分別于10月20日—12月20日每隔5天進行播期試驗，種成穗行，行長1.5m，行距8寸，花期套袋，根據花藥吐絲和穎殼開張程度與鏡檢情況和收獲調查籽粒結實情況，篩選不育系，測定新材料的不育區間和恢復區間；

3)嚴格篩選，選育出紅皮、矮桿、赤霉病抗性強的G30、G31、G32不育系兩系材料；所述的G30、G31、G32不育系兩系材料適合在長江中下游地區生長；

4)不育系提純：對篩選出來的G30、G31、G32不育系兩系材料于11月5日播種，種成穗行，行長1.5m，行距8寸，花期根據花藥吐絲和穎殼開張程度與鏡檢情況，拔除不育度差的麥株，剩余材料于5月1日前，割除主莖穗，并每行施尿素50～100g，促進次分蘗或幼穗開花結實，留取種子擴繁。

2.根據權利要求1所述的小麥溫光敏型不育系轉育方法，其特征在于：所述的G30、G31、G32不育系兩系材料整個生育期歷經的溫度范圍為：-6℃～32℃。

3.根據權利要求1所述的小麥溫光敏型不育系轉育方法，其特征在于：所述步驟4)采用組織培養方法替代，具體是對篩選出來的G30、G31、G32不育系兩系材料，進行組織培養加速純合，一年自交提純7代左右。

4.根據權利要求3所述的小麥溫光敏型不育系轉育方法，其特征在于：所述組織培養的過程如下：

將開花灌漿12天的小麥幼胚，在水中預浸24小時，用1％次氯酸溶液消毒10分鐘，消毒后的種子在無菌條件下用蒸餾水漂洗三次，放置在含有培養基的培養皿里，將培養皿在溫度為20-22℃的室內放置，無任何額外的照明，經20-72小時，胚胎開始萌發，培養皿轉移到培養器中，用熒光燈照射16個小時，白天25℃，晚上22℃，當幼苗長出1.5-2厘米的胚芽鞘，幼苗轉放入56格kwikpot托盤或30格kwikpot托盤中，將托盤放入環境可控的設備中，對其設置白天溫度25±1℃，晚上溫度22±1℃，白天相對濕度65％，晚上相對濕度85％，在500lx光強下照射16小時，在植物生長過程中通過水分調節生長，只有在枯萎的時候才進行澆灌，40-50天產生一代自交種。

5.根據權利要求4所述的小麥溫光敏型不育系轉育方法，其特征在于：所述的培養基的配制方法為：將100ml冷凍的嫩椰子汁、3gMS培養基、10g蔗糖和2mlMS維生素原液混合均勻，用1mol/L的KOH調節其pH為5.8，然后加入植物凝膠5.2g/L，最后加水至1L蓋上蓋子，蓋子放上面不要擰緊，放入高壓鍋消毒20分鐘，1L培養基制成30個直徑9cm的培養皿，每個培養皿放20-30個胚胎；所述的MS維生素原液的配制方法為：將20mg鹽酸硫胺素、100mg鹽酸吡多醇、100mg煙酸、400mg甘氨酸、和20g肌醇，用水溶解配成200ml溶液，-20℃存儲。

6.根據權利要求4所述的小麥溫光敏型不育系轉育方法，其特征在于：所述的56格kwikpot托盤或30格kwikpot托盤中，含有50％的沙子和50％的泥炭。