[發(fā)明專利]一種高芽孢率地衣芽孢桿菌的生產(chǎn)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510525282.1
• 申請日: 2015-08-25
• 公開（公告）號: CN105062947B
• 公開（公告）日: 2018-10-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉揚(yáng)科;郭文江;胡國春;楊婧芳;宋宇鵬;趙福生;王慶芳;龍婉慶;路廣亮
• 申請（專利權(quán)）人: 林州中農(nóng)穎泰生物肽有限公司
• 主分類號: C12N1/38
• 分類號: C12N1/38;C12N1/20;C12R1/10
• 代理公司: 鄭州中原專利事務(wù)所有限公司 41109
• 代理人: 張春;王曉麗

一種高芽孢率地衣芽孢桿菌的生產(chǎn)方法，在發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)基中不添加氯化錳，而在發(fā)酵23~25h補(bǔ)入發(fā)酵體積的0.03~0.04%滅菌氯化錳溶液，本發(fā)明通過發(fā)酵中后期添加氯化錳，既不影響地衣芽孢桿菌的早期生長，又提高了地衣芽孢桿菌的成孢率，縮短了發(fā)酵周期，從而降低發(fā)酵生產(chǎn)成本，取得更好的產(chǎn)品品質(zhì)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種高芽孢率地衣芽孢桿菌的生產(chǎn)方法。

背景技術(shù)

地衣芽孢桿菌具有較強(qiáng)的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶的活性，能促進(jìn)飼料中營養(yǎng)素降解，刺激動物免疫器官的發(fā)育，增強(qiáng)機(jī)體免疫力能產(chǎn)生抗活性物質(zhì)酶，并具有獨(dú)特的生物奪氧作用機(jī)制，能抑制致病菌的生長繁殖，是一種綠色飼料添加劑，地衣芽孢桿菌形成芽孢以后具有抗逆性強(qiáng)，耐熱，不易死亡，易儲存。 所以提高地衣芽孢桿菌發(fā)酵過程中的成孢方法是發(fā)酵生產(chǎn)過程的一個(gè)重點(diǎn)。

現(xiàn)有的一般生產(chǎn)工藝過程是在發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入0.02%的硫酸錳，錳離子具有促進(jìn)芽孢形成的作用，但錳離子也能抑制地衣芽孢桿菌菌體的生長繁殖，所以錳的用量收到限制，成孢率低，只有85%左右，要提高成孢率就要延長發(fā)酵時(shí)間，增加生產(chǎn)成本。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的就在于為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足而提供一種高芽孢率地衣芽孢桿菌的生產(chǎn)方法。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：

一種高芽孢率地衣芽孢桿菌的生產(chǎn)方法，包括以下步驟：

1)搖瓶培養(yǎng)：將地衣芽孢桿菌接種到搖瓶培養(yǎng)基上，接種量為體積比1:(80~120)，進(jìn)行搖床培養(yǎng)；

2)種子罐培養(yǎng)：將步驟1）得到的地衣芽孢桿菌菌液接種到種子培養(yǎng)基上，接種量體積比1:(80~120)，進(jìn)行培養(yǎng)；

3)發(fā)酵罐培養(yǎng)：將步驟2）得到的地衣芽孢桿菌菌液接種到發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基上，接種量體積比1:(80~120)，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，發(fā)酵溫度35~37℃，轉(zhuǎn)速為180~200rpm/min，通氣量為1:（0.7~1.0），發(fā)酵過程pH值為6.0~7.8；整體發(fā)酵時(shí)間為30~36h；

發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)基配方為：玉米淀粉2~4%；豆粕1~3%；蛋白胨0.5~1.5%；硫酸鎂0.04~0.06%；碳酸鈣0.5~0.7%；磷酸二氫鉀0.2~0.4%；消泡劑0.015~0.025%；

4)發(fā)酵23~25h補(bǔ)入發(fā)酵體積的0.03~0.04%滅菌氯化錳溶液。

步驟1)中每升搖瓶培養(yǎng)基中蛋白胨8~12g，酵母粉3~7g，食鹽3~7g，其余為水。

步驟1)中搖床轉(zhuǎn)速為180~220rpm/min，溫度35~37℃，培養(yǎng)時(shí)間10~12小時(shí)。

步驟2)中種子培養(yǎng)基配方為：蛋白胨1.5~2.5%，酵母粉0.5~1.5%，氯化鈉0.4~0.6%，其余為水，以上所述原料含量為質(zhì)量分?jǐn)?shù)。

步驟2)中培養(yǎng)條件為：轉(zhuǎn)速180~220rpm/min，溫度35~37℃，培養(yǎng)時(shí)間10~12小時(shí)。

步驟3)中消泡劑為硅油消泡劑。

步驟4) 氯化錳溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)濃度為5%。

本發(fā)明通過發(fā)酵中后期添加氯化錳，既不影響地衣芽孢桿菌的早期生長，又提高了地衣芽孢桿菌的成孢率，縮短了發(fā)酵周期，從而降低發(fā)酵生產(chǎn)成本，取得更好的產(chǎn)品品質(zhì)。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

一種高芽孢率地衣芽孢桿菌的生產(chǎn)方法，包括以下步驟：