[發明專利]一種新型的淀粉酶

有效

• 申請號: 201510523652.8
• 申請日: 2015-08-24
• 公開（公告）號: CN106479996B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發明（設計）人: 于鈺;曾阿娜;陳苗苗;馮曉琴
• 申請（專利權）人: 豐益(上海)生物技術研發中心有限公司
• 主分類號: C12N9/26
• 分類號: C12N9/26;C12N15/56;C12N15/63;C12P7/06;C12G3/02
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司 31100
• 代理人: 韋東

本發明涉及一種新型的淀粉酶，所述淀粉酶含有(1)SEQ ID NO:2第1－306位氨基酸序列；或(2)在(1)所述的氨基酸序列中經過取代、缺失或添加一個或幾個氨基酸，同時保留SEQ ID NO:2第1－306位氨基酸序列所具備的磷脂酶活性的由(1)衍生的多肽。本發明還涉及所述淀粉酶的多核苷酸序列，含有所述多核苷酸序列的核酸構建體，所述多核苷酸序列或核酸構建體的宿主細胞，含有所述多肽的組合物，以及所述多肽的用途。

技術領域

本發明屬于淀粉酶領域，具體涉及一種新型淀粉酶。

背景技術

淀粉酶(amylase)是一種可以水解淀粉，糖原和多糖，并使它們轉化為糖的一類酶的統稱。廣泛分布于植物，動物，微生物中，大量生產還是依賴于微生物的發酵，是一種研究最廣，時間最久，應用最早的工業用酶，占整個酶制劑用量的50％以上。主要有以下幾類：

α-淀粉酶：主要水解底物內部的糖苷鍵；

β-淀粉酶：主要從非還原性末端將麥芽糖單位水解下來；

葡萄糖淀粉酶：從底物的非還原性末端將葡萄糖單位水解下來；

脫支酶：只對支鏈淀粉，糖原等分支點的α-1，6糖苷鍵有專一性。可參見張樹正，《酶制劑工業》，北京:科學出版社，1984。

淀粉酶被廣泛應用在不同工業：

1、釀酒應用：將淀粉直接發酵生產乙醇，在酒精生產和釀酒工業中使用淀粉酶，能保證發酵物中的酶活性一致，能夠提高糖化率，酒精出率和酵母的生長，除此以外，還能夠提高啤酒的口感。

2、烘焙應用：面包烘烤工業中，使用淀粉酶可以使產品體積更大，顏色更好，顆粒更柔軟，對面包的口感，品質也都有促進作用。

3、淀粉脫漿：現代纖維制造工藝容易產生大量的細菌，為防止紗線斷裂，往往在表面加一層淀粉，淀粉脫漿可以用淀粉酶水解淀粉，因而容易被洗掉，反應過程綠色，環保，無污染〔呂晶、陳水林，“酶及其在紡織加工中的應用”，《紡織學報》，2002，2(23)：155-157〕。

4、除垢劑中的應用：在除垢劑中，淀粉酶也是其中重要成分之一，其主要功能是能夠使除垢劑更加溫和，降低殘留對人體的傷害。目前已經被大量應用于洗滌行業，市場占有率最高的淀粉酶廠家是諾維信和杰能科，主要優點是通過利用基因改造得技術使得它們的酶具有良好的儲存穩定性〔Van Ee J H、van Rijswijk W C、Bollier M.，Enzymaticautomated dish-wash detergents，Chim Oggi，1992，10:21-24〕。

目前國際上只有諾維信，丹尼斯特和帝斯曼等少數幾家公司擁有真菌淀粉酶的先進生產技術與產品，發酵水平在2000U/g以上，我國在淀粉酶上的相關技術還存在不足，國內報道的發酵水平大多數在200-600U/g，國內市場供應的淀粉酶都還是來自國外，國內企業在競爭上還是處于劣勢〔李松、王正祥，“真菌α-淀粉酶的研究進展”，《生物技術通報》，2011(3):67-7〕。

發明內容

本發明提供一種分離的多肽，該多肽含有：

(1)SEQ ID NO:2第1－306位氨基酸序列；或

(2)在(1)所述的氨基酸序列中經過取代、缺失或添加一個或幾個氨基酸，同時保留SEQ ID NO:2第1－306位氨基酸序列所具備的磷脂酶活性的由(1)衍生的多肽。

在一個具體實施方式中，所述分離的多肽：

(a)如SEQ ID NO:2所示，或

(b)含有選自前導肽、末端延伸、GST、麥芽糖E結合蛋白、蛋白A、如6His或Flag的標簽，或Xa因子或凝血酶或腸激酶的蛋白水解酶位點的氨基酸序列。