[發明專利]一種VKORC1基因擴增的檢測引物組及試劑盒

在審

• 申請號: 201510515760.0
• 申請日: 2015-08-20
• 公開（公告）號: CN105112521A
• 公開（公告）日: 2015-12-02
• 發明（設計）人: 劉沛;丁朋舉;李江浩;王林海
• 申請（專利權）人: 北京鑫諾美迪基因檢測技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京同輝知識產權代理事務所(普通合伙) 11357
• 代理人: 劉洪勛;郭麗英

1.VKORC1基因擴增的檢測引物組，其特征在于，所述VKORC1檢測引物組包括：

VKORC1-PD-F1：如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列，或由SEQIDNO:1所示的核苷酸序列經取代、缺失、添加形成的核苷酸序列；

VKORC1-PD-F2：如SEQIDNO:2所示的核苷酸序列，或由SEQIDNO:2所示的核苷酸序列經取代、缺失、添加形成的核苷酸序列；

VKORC1-PD-R：如SEQIDNO:3所示的核苷酸序列，或由SEQIDNO:3所示的核苷酸序列經取代、缺失、添加形成的核苷酸序列。

其中，所述VKORC1-PD-R為熒光引物，其5’端標記有熒光基團。

2.如權利要求1所述的VKORC1基因擴增的檢測引物組，其特征在于，所述熒光基團選自由6-羧基熒光素、六氯-6-甲基熒光素、VC熒光染料、四氯-6-羧基熒光素、羧基-X-羅丹明、6-羧基四甲基羅丹明、磺酰羅丹明、6-羧基-4’,5’-二氯-2’,7’-二甲氧基熒光素琥珀酰亞胺酯、花菁3、花菁5和花菁5.5中的至少一種。

3.如權利要求2所述的VKORC1基因擴增的檢測引物組，其特征在于，所述VKORC1-PD-R的熒光基團為6-羧基熒光素，HER2-PD-R的熒光基團為HEX。

4.VKORC1基因擴增檢測試劑盒，其特征在于，包括權利要求1-3任一項所述的VKORC1基因擴增的檢測引物組。

5.如權利要求4所述的VKORC1基因擴增檢測試劑盒，其特征在于，還包括含Mg²⁺、Taq酶及dNTPs的PCR反應液。

6.如權利要求4所述的VKORC1基因擴增檢測試劑盒，其特征在于，還包括陰性質控品、陽性質控品；

所述陰性質控品為純化水；所述陽性質控品為滅活全血。

7.如權利要求4所述的VKORC1基因擴增檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒分為陰性質控品、陽性質控品、VKORC1反應體系；

所述VKORC1反應體系包括VKORC1PCR反應液12.5μL，VKORC1引物混合液6.5μL，待測樣本DNA2μL，純化水4μL，共配成25μL反應體系；

其中所述VKORC1引物混合液的組成為：1.5μL的VKORC1-PD-F1，1.5μL的VKORC1-PD-F2，1.5μL的VKORC1-PD-R。

8.VKORC1基因擴增檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，具體過程如下：

(1)樣本處理和核酸提取；

(2)進行PCR反應；

(3)通過基因分析儀進行測序檢測，得到片段分析結果。

9.如權利要求8所述的使用方法，其特征在于，步驟(1)中所述的樣本為人類基因組DNA，OD260/OD280在1.8-2.0,DNA總量在3-15μg,稀釋DNA的終濃度至50-125ng/μL。

10.如權利要求9所述的使用方法，其特征在于，稀釋DNA的終濃度至50ng/μL。