[發明專利]基因治療載體和胞嘧啶脫氨酶

在審

• 申請號: 201510505943.4
• 申請日: 2009-09-26
• 公開（公告）號: CN105274125A
• 公開（公告）日: 2016-01-27
• 發明（設計）人: 哈利·E·格魯貝爾;道格拉斯·喬利;奧馬爾·佩雷斯;克里斯托弗·R·洛格
• 申請（專利權）人: 托卡根公司
• 主分類號: C12N15/55
• 分類號: C12N15/55;C12N15/54;C12N9/78;C12N9/10;C12N15/867;C12N5/10;C12N15/48;A61K48/00;A61P35/00;A61P19/02;A61P29/00;A61P37/02
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270
• 代理人: 武晨燕;遲姍

1.分離的多核苷酸，包含：

編碼SEQIDNO：4的多肽的人密碼子優化的多核苷酸，其中所述多肽包含胞嘧啶脫氨酶(CD)活性。

2.權利要求1的分離的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQIDNO：3所示序列并且包含1-50個沉默突變。

3.權利要求1或2的分離的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQIDNO：3。

4.權利要求1的分離的多核苷酸，還包含編碼具有UPRT或OPRT活性的多肽的UPRT或OPRT多核苷酸，所述具有UPRT或OPRT活性的多肽可操作連接至具有CD活性的多肽。

5.權利要求4的分離的多核苷酸，其中UPRT或OPRT多核苷酸是密碼子優化的。

6.權利要求4的分離的多核苷酸，其中UPRT或OPRT多核苷酸通過連接體與編碼具有CD活性的多肽的多核苷酸分開。

7.分離的多核苷酸，包含：

編碼具有胞嘧啶脫氨酶活性的多肽的第一編碼序列；和

編碼具有URPT或OPRT活性的多肽的第二編碼序列，

其中第一編碼序列可操作連接至第二編碼序列。

8.權利要求7的分離的多核苷酸，其中第一和第二編碼序列通過編碼肽連接體的序列分開。

9.權利要求7的分離的多核苷酸，其中所述多核苷酸編碼包含SEQIDNO：12、14或16中所示序列的多肽。

10.基本上純的通過權利要求1、2、4或7的多核苷酸的表達產生的多肽。

11.包含權利要求1、2、4或7的多核苷酸的載體。

12.權利要求11的載體，其中所述載體是質粒。

13.權利要求11的載體，其中所述載體是表達載體。

14.權利要求11的載體，其中所述載體包括病毒載體。

15.權利要求14的載體，其中所述病毒載體包括可復制型反轉錄病毒。

16.含有權利要求12、13、14或15的載體的宿主細胞。

17.包含權利要求1、4或7的多核苷酸的宿主細胞。

18.權利要求17的宿主細胞，其中所述宿主細胞包括人細胞。

19.權利要求18的宿主細胞，其中所述宿主細胞包括包含細胞增殖性病癥的細胞。

20.權利要求17的宿主細胞，其中所述宿主細胞包括穩定轉化的人細胞。

21.權利要求20的宿主細胞，其中所述宿主細胞包含細胞增殖性病癥。

22.權利要求19或21的宿主細胞，其中所述宿主細胞包含多形性成膠質細胞瘤。

23.權利要求17的宿主細胞，其中所述宿主細胞被體內轉化。

24.重組的可復制型反轉錄病毒(RCR)，包含：

反轉錄病毒GAG蛋白；

反轉錄病毒POL蛋白；

反轉錄病毒包膜；

反轉錄病毒多核苷酸，包含反轉錄病毒多核苷酸序列3'端的長末端重復(LTR)序列、反轉錄病毒多核苷酸5'端的啟動子序列、gag核酸結構域、pol核酸結構域和env核酸結構域，所述啟動子適于在哺乳動物細胞中表達；

盒，包含可操作連接至包含權利要求1的多核苷酸的異源核酸的內部核糖體進入位點(IRES)，其中所述盒位于3'LTR的5'位置和編碼所述反轉錄病毒包膜的env核酸結構域的3'位置；和

對于在靶細胞中反轉錄、包裝和整合必需的順式作用序列。

25.權利要求24的反轉錄病毒，其中反轉錄病毒多核苷酸序列衍生自鼠白血病病毒(MLV)、莫洛尼鼠白血病病毒(MoMLV)、貓科白血病病毒或長臂猿白血病病毒(GALV)。

26.權利要求24或25的反轉錄病毒，其中MLV是雙嗜性MLV。

27.權利要求24的反轉錄病毒，其中所述反轉錄病毒是γ反轉錄病毒。

28.權利要求24的反轉錄病毒，其中所述靶細胞是具有細胞增殖性病癥的細胞。