[發明專利]一株具有抑制產氣莢膜梭菌作用的枯草芽孢桿菌及其應用

有效

• 申請號: 201510501784.0
• 申請日: 2015-08-14
• 公開（公告）號: CN105039223B
• 公開（公告）日: 2018-05-25
• 發明（設計）人: 單寶龍;陳雷;谷巍;程福亮;徐海燕;王紅;陳甜甜;樊梅娜;辛國芹;聶兆晶;房棟;趙影;王春鳳
• 申請（專利權）人: 山東寶來利來生物工程股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K35/742;A61P31/04;A61P1/00;C12R1/125
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 張勇

1.一株具有抑制產氣莢膜梭菌作用的枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）BLCC1-0155，于2015年05月07日保藏于位于中國武漢市武漢大學的中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO: M 2015278。

2.一種菌劑，其特征在于，該菌劑的活性成分為權利要求1所述的枯草芽孢桿菌BLCC1-0155。

3.如權利要求2所述的菌劑，其特征在于，所述菌劑的劑型為噴干或凍干菌粉。

4.權利要求2所述的菌劑的制備方法，其特征在于，步驟為：

（i）菌種：以權利要求1所述的枯草芽孢桿菌作為菌種；

（ii）斜面培養：將步驟（i）的菌種接種于固體斜面培養基上，在32～40℃培養20～28h；

（iii）一級種子培養：將培養好的斜面，在無菌條件下接種于種子液體培養基中，在32～40℃條件下，靜置培養14～18h，制得一級種子液；

（iv）擴大培養：以4-6％的接種量，將一級種子液接于種子液體培養基中，在32～40℃條件下，靜置培養10～16h，制得二級種子液；

（v）發酵罐培養：以4-6％的接種量，將二級種子液接于液體發酵培養基中，于32～40℃條件下，靜置培養16～24h；

（vi）當發酵液黏度達12000～15000cP 時，收集發酵液；發酵液經干燥處理后，即得菌劑；

步驟（iii）和步驟（iv）中，所述種子液體培養基的配方為：葡萄糖20 g/L、蛋白胨10 g/L、酵母膏5 g/L，使用時，調節pH至6.5～7.5；

步驟（ii）中，所述固體斜面培養基為在種子液體培養基中添加質量分數為1.5～2.0%的瓊脂粉；

步驟（v）中，所述液體發酵培養基的配方為：葡萄糖20 g/L、蛋白胨10 g/L、酵母膏5 g/L，氯化鈉5 g/L，使用時，調節pH至 6.5～7.5。

5.權利要求1所述的菌株和/或權利要求2所述的菌劑在制備防治肉雞壞死性腸炎的微生態制劑中的應用。

6.一種用于預防和/或治療肉雞壞死性腸炎的微生態制劑，其特征在于，該微生態制劑以權利要求1所述的菌株和/或權利要求2所述的菌劑為有效成分。

7.如權利要求6所述的微生態制劑，其特征在于，該微生態制劑為枯草芽孢桿菌BLCC1-0155的菌劑與玉米淀粉載體復配而成，復配后的微生態制劑中枯草芽孢桿菌BLCC1-0155的活菌數大于或等于1×108cfu/g。