[發明專利]N1,N1-二異丙基乙二胺的高效液相色譜分析方法

在審

• 申請號: 201510499424.1
• 申請日: 2015-08-15
• 公開（公告）號: CN105021740A
• 公開（公告）日: 2015-11-04
• 發明（設計）人: 杜煥達;周衛楓;鄭春燕
• 申請（專利權）人: 杭州新博思生物醫藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種N₁,N₁-二異丙基乙二胺的高效液相色譜分析方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）配制不同濃度的N₁,N₁-二異丙基乙二胺標準溶液，分別加入過量2，4-二硝基氟苯進行衍生化反應，反應結束后對反應液進行高效液相色譜分析，以DNB-?N₁,N₁-二異丙基乙二胺峰面積對應N₁,N₁-二異丙基乙二胺濃度繪制標準曲線；

（2）將供試品配成溶液，加入過量2，4-二硝基氟苯進行反應，反應結束后對反應液進行高效液相色譜分析，根據DNB-N₁,N₁-二異丙基乙二胺的峰面積和步驟（1）中的標準曲線計算供試品中的N₁,N₁-二異丙基乙二胺含量。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：還包括定量限和檢測限的確定，其方法為：取N₁,N₁-二異丙基乙二胺標準溶液適量，逐級稀釋至限度溶液，加入過量的2，4-二硝基氟苯進行反應，反應結束后對反應液進行高效液相色譜分析，考察DNB-?N₁,N₁-二異丙基乙二胺峰的信噪比，確定定量限和檢測限。

3.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于：還包括N₁,N₁-二異丙基乙二胺回收率的測定，其方法為：取適量供試品，加入不同濃度的N₁,N₁-二異丙基乙二胺標準溶液，分別加入過量2，4-二硝基氟苯進行反應，反應結束后對反應液進行高效液相色譜分析，計算N₁,N₁-二異丙基乙二胺的回收率。

4.根據權利要求1～3任一項所述的檢測方法，其特征在于：高效液相色譜條件為：

色譜柱：?C18柱，規格為?4.6×150mm，5.0μm；

檢測波長：360nm；

柱溫：35～45℃；

流速：0.8～1.2?ml/min；

進樣量：10～20μl；

流動相：乙腈-0.05mol/L醋酸鈉溶液。

5.根據權利要求1～3任一項所述的檢測方法，其特征在于：所述衍生化反應的溫度為45℃～55℃，反應時間為20～40分鐘，pH值為8～9。

6.根據權利要求1～3任一項所述的檢測方法，其特征在于：所述供試品為阿考替胺、鹽酸阿考替胺或鹽酸阿考替胺片劑。

7.根據權利要求4所述的檢測方法，其特征在于：所述流動相中的0.05mol/L醋酸鈉溶液與乙腈混合之前，先用稀醋酸調節pH至6.4。

8.根據權利要求4所述的檢測方法，其特征在于：乙腈與0.05mol/L醋酸鈉溶液的體積比為60:40～70:30。

9.根據權利要求5所述的檢測方法，其特征在于：所加入的2，4-二硝基氟苯為1%～2%的2，4-?二硝基氟苯乙腈溶液；衍生化反應具體步驟為：取1ml?樣品溶液、置5ml棕色量瓶中，加入1～2ml?0.04?～0.06?mol/L碳酸鈉溶液和0.8～1.2ml?1%～2%的2，4-二硝基氟苯乙腈溶液，于45℃～55℃下反應20～40分鐘，反應結束后，冷卻，用乙腈-水（體積比為50：50）定容到刻度，搖勻。