[發明專利]用于食管癌診斷的標志物

有效

• 申請號: 201510493944.1
• 申請日: 2015-08-12
• 公開（公告）號: CN105067822B
• 公開（公告）日: 2017-05-24
• 發明（設計）人: 劉萬里;曾木圣;邢珊;鄭炘
• 申請（專利權）人: 中山大學附屬腫瘤醫院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司44205
• 代理人: 胡輝,許飛

技術領域

本發明涉及一種用于食管癌診斷的標志物。

背景技術

食管癌是常見的消化道腫瘤，全世界每年約有30萬人死于食管癌。其發病率和死亡率各國差異很大。我國是世界上食管癌高發地區之一，每年平均病死約15萬人。男多于女，發病年齡多在40歲以上。食管癌典型的癥狀為進行性咽下困難，先是難咽干的食物，繼而是半流質食物，最后水和唾液也不能咽下。食管癌的檢測是有效治療食管癌的基礎。

目前臨床應用的食管癌血清標志物主要有鱗狀細胞癌抗原(Squamous Cell Carcinoma Antigen，SCCA)、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen，CEA)、細胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)。但現有的血清學標志物都存在靈敏度和特異性不高的缺點，尤其在食管癌早期診斷方面更突出。國外報道，血清CEA診斷早期食管鱗癌的靈敏度僅約為17％^[1]，血清SCCA診斷早期和中晚期食管鱗癌的靈敏度分別為22％和37％^[2]。CYFRA21-1診斷早期和中晚期食管鱗癌的靈敏度分別為22.2％和77.8％。國內報道，CEA，Cyfra21-1及SCCA診斷食管鱗癌的陽性率分別為10.3％，25.6％及42.3％^[3]。這些研究均說明傳統的血清腫瘤標志物診斷食管鱗癌的靈敏度均較低。因此，尋找新的血清標志物，提高食管鱗癌診斷靈敏度是近年來的一個研究熱點。

目前篩選新的食管癌血清診斷標志物主要采用以下3個策略：

(1)采用表觀遺傳學篩選血清食管癌特異性甲基化DNA標志物的策略：Kuroki等^[4]研究發現FHIT,CDKN2A,MGMT,RASSF1等腫瘤相關基因在食管癌組織中存在異常甲基化，可在血液中檢測到這些異常甲基化的游離DNA，診斷食管癌的靈敏度為45％，特異性78％。Lima等^[5]利用Illumina GoldenGate甲基化芯片比較10對食管癌與癌旁組織的異常甲基化狀態，篩選出TFF1作為潛在的腫瘤早期診斷指標，靈敏度達61％。國內李波等^[6]從食管癌組織中篩選出5個異常甲基化基因p16,CDH1,RASSF1A,DAPK和RAR-β，其中CDH1,DAPK和RASSF1A存在于在外周血中，診斷食管癌的靈敏度為84.4％，特異性為86.7％。李旭峰等^[7]篩選出3個存在于血液中的異常甲基化基因EPB41L3,GPX3和COL14A1，聯合檢測診斷食管癌的靈敏度64.3％，特異性達100％。血液中異常甲基化DNA診斷食管癌的靈敏度和特異性明顯高于傳統血清腫瘤標志物。但其不足之處在于各研究小組篩選出的異常甲基化DNA各不相同，其診斷效能還有待進一步驗證。另外多數研究未報道其診斷早期食管癌的靈敏度，仍有待進一步研究，且甲基化DNA檢測技術復雜，不易于臨床普遍開展。

(2)蛋白組學尋找新的食管癌血清標志物策略：近年來采用蛋白組學技術，比較食管癌患者和正常人血清蛋白組的表達差異，尋找食管癌診斷血清標志物。范乃軍等^[8]通過蛋白組技術在食管癌患者血清中尋找到3個上調表達蛋白，診斷食管癌靈敏度為60％-70％。劉麗華等^[9]篩選出不同的蛋白組合，其診斷食管癌的靈敏度接近90％。由于血清中存在高豐度蛋白如白蛋白和IgG，不可避免地干擾低豐度蛋白的檢測，蛋白組技術對低豐度蛋白的靈敏度和精密度均不能達到分析的要求。采用此策略尋找新的食管癌血清診斷標志物，可能會漏掉一些潛在的有診斷價值的靶蛋白。

(3)microRNA芯片篩選新的血清食管癌標志物策略：張辰宇等^[10]采用microRNA芯片篩選出對食管癌有較高診斷價值的7種miRNA：miR-10a,miR-22,miR-100,miR-148b,miR-223,miR-133a和miR-127-3p，診斷靈敏度約為81.2％，特異性約為83.0％。Yamamoto S等^[11]也發現miR-507,-634,-450a,-129-5p與食管癌發生發展密切相關，診斷食管癌靈敏度約60％。盡管此策略篩選的血清miRNA標志物診斷靈敏度較高，特異性也較好，但不同的研究組篩選的miRNA不同，其診斷價值也有待驗證，并且血清miRNA的檢測技術要求高，操作復雜，大批量測定較麻煩，不適合臨床普遍應用。