[發(fā)明專利]一種鹿茸蛋白提取物及其應(yīng)用、藥物制劑

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510487130.7
• 申請(qǐng)日: 2015-08-10
• 公開（公告）號(hào): CN104987359B
• 公開（公告）日: 2018-11-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 霍虹;霍玉書;范一鳴
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林玉參醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號(hào): C07K2/00
• 分類號(hào): C07K2/00;C07K1/14;A61K38/02;A61P9/00;A61P9/10;A61P17/02
• 代理公司: 北京集佳知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11227
• 代理人: 趙青朵

本發(fā)明涉及蛋白提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種鹿茸蛋白提取物及其應(yīng)用、藥物制劑。該鹿茸蛋白提取物的制備方法包括：將新鮮鹿茸抽血、凍干、粉碎，獲得鹿茸粉末；將鹿茸粉末與緩沖溶液混合，超聲提取，離心，收集上清液，真空冷凍干燥，獲得鹿茸蛋白提取物；緩沖溶液的pH值為7.0～8.0，濃度為10～50mM。本發(fā)明最大限度地保持了鹿茸蛋白的生物活性和提取效率；本發(fā)明制得的鹿茸蛋白提取物具有促進(jìn)血管細(xì)胞生長或增殖作用，特別是對(duì)人臍靜脈上皮細(xì)胞(HUVEC)生長的增殖率達(dá)到200％。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及蛋白提取技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種鹿茸蛋白提取物及其應(yīng)用、藥物制劑。

背景技術(shù)

鹿茸為我國傳統(tǒng)名貴中藥，已有2000多年的入藥歷史。李時(shí)珍在《本草綱目》上稱鹿茸“善于補(bǔ)腎壯陽、生精益血、補(bǔ)髓健骨”。古典醫(yī)籍《神農(nóng)本草經(jīng)》對(duì)其功能和主治也有詳細(xì)記載：“味甘、性溫，主漏下惡血、寒熱驚癇、益氣強(qiáng)志、生齒不老”。鹿茸性溫而不燥，具有振奮和提高機(jī)體功能，對(duì)全身虛弱、久病之后患者，有較好的強(qiáng)身作用。現(xiàn)代藥物化學(xué)分析表明，鹿茸中含有多種生理活性成分，具有抗衰老、抗氧化、提高機(jī)體免疫力、促進(jìn)傷口愈合等多種功效。鹿茸作為鹿體最活躍的生長點(diǎn)，每年周期性地生長、骨化與脫落，在骨化之前貯存了大量調(diào)節(jié)生長的生長因子及相關(guān)蛋白。研究表明鹿茸中含有脂類、多糖、多胺、蛋白質(zhì)及多肽、激素樣物質(zhì)、生物堿等多種化學(xué)成分，其中蛋白質(zhì)、多肽類物質(zhì)占總重量的50％以上，這是鹿茸具有廣泛生物活性的基礎(chǔ)。

霍玉書等(鹿茸生長因子制劑及工藝，CN 1104095A)公開了一種鹿茸中生長因子制劑的生產(chǎn)工藝，該制備方法是將鹿茸粉碎浸提，浸提液經(jīng)過濾除菌，再經(jīng)層析分離出含有神經(jīng)生長因子、上皮細(xì)胞生長因子等多肽的制劑。該制劑具有安全性，無副作用，無異種蛋白抗原反應(yīng)。但國內(nèi)外對(duì)鹿茸提取物中的大分子蛋白的提取及功效研究鮮有報(bào)道。

研究表明鹿茸的提取工藝對(duì)鹿茸中生理活性成分的保留有很大的影響。雖然對(duì)鹿茸的研究歷史悠久，但傳統(tǒng)的加工技術(shù)以反復(fù)水煮、烘烤和風(fēng)干為主，活性物質(zhì)的提取率低，并且對(duì)蛋白質(zhì)等成分的破壞顯著影響了鹿茸的功效。因此，如何更好地保留鹿茸中活性蛋白的成分成為了中藥提取領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明提供了一種鹿茸蛋白提取物及其應(yīng)用、藥物制劑。該發(fā)明在提取過程中采用接近生理pH和生理滲透壓的緩沖溶液作為提取劑，且在提取過程中保持低溫環(huán)境，最后階段使用真空冷凍干燥制備鹿茸蛋白提取物，整個(gè)制備工藝最大限度地保持了鹿茸蛋白的生物活性和提取效率；本發(fā)明制得的鹿茸蛋白提取物具有促進(jìn)血管細(xì)胞生長或增殖作用，特別是對(duì)人臍靜脈上皮細(xì)胞(HUVEC)生長的增殖率達(dá)到200％。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種鹿茸蛋白提取物，其制備方法包括如下步驟：

將新鮮鹿茸抽血、凍干、粉碎，獲得鹿茸粉末；

將鹿茸粉末與緩沖溶液混合，超聲提取，離心，收集上清液，真空冷凍干燥，獲得鹿茸蛋白提取物；

緩沖溶液的pH值為7.0～8.0，濃度為10～50mM。

本發(fā)明選用不同生長時(shí)期新鮮鹿茸，在提取過程中采用接近生理pH和生理滲透壓的緩沖溶液作為提取劑，且在提取過程中保持低溫環(huán)境，最后階段使用真空冷凍干燥制備鹿茸蛋白提取物，整個(gè)制備工藝最大限度地保持了鹿茸蛋白的生物活性和提取效率。本發(fā)明工藝簡單，提取效率高，能夠?qū)β谷姿幱脙r(jià)值充分利用。

作為優(yōu)選，鹿茸為毛桃、鞍子、二杠、掛角、三岔、花砍茸或蓮花中的一種或兩者以上的混合物。

優(yōu)選地，鹿茸為毛桃、二杠或三岔中的一種或兩者以上的混合物。

更優(yōu)選地，鹿茸為毛桃。

作為優(yōu)選，緩沖溶液為Tris-base溶液、PBS緩沖液或Tris-HCl緩沖液。