[發明專利]肺動脈高壓治療藥物的干細胞篩選模型及應用

在審

• 申請號: 201510475276.X
• 申請日: 2015-08-05
• 公開（公告）號: CN105062976A
• 公開（公告）日: 2015-11-18
• 發明（設計）人: 楊雋;周芳;宮世強;韋清霞;趙雙;司書毅
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院基礎醫學研究所
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/85;C12Q1/6897;C12Q1/66;C12Q1/02
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 楊厚;王為

本發明屬于應用干細胞技術建立肺動脈高壓新型治療藥物篩選的技術，以BMP信號下游關鍵基因Id1基因為靶點，設計雙報告基因原件插入Id1基因組構建重組載體，并轉入人胚胎干細胞株，獲得穩定表達的CGMCC11091的細胞株，將待測抗肺動脈高壓的化合物刺激CGMCC11091的細胞株，再用細胞裂解液裂解細胞，按基因檢測系統所述方法檢測熒光素酶表達活性，以Id1啟動子驅動的雙報告基因表達量作為指標，獲得對Id1表達上調的治療肺動脈高壓化合物的篩選模型，本發明還包括模型在上調骨形態形成蛋白(BMP)信號的調節劑；上調骨形態形成蛋白II型受體表達水平的調節劑；改善肺動脈血流動力學的制劑；改善肺血管重構的制劑；肺動脈高壓治療藥物以及心肺血管疾病治療藥物篩選中的應用。

技術領域

本發明屬于應用干細胞技術建立肺動脈高壓新型治療藥物篩選方法的技術鄰域。

背景技術

肺動脈高壓(PAH)是由于肺小動脈原發病變而導致的肺動脈阻力增加，是一種少發但高致死率的病癥。肺血管阻力進行性升高，最終導致患者右心衰竭而死亡。其主要病理特征是嚴重肺血管重構，包括內皮功能紊亂和平滑肌細胞增殖所致的小肺動脈內膜纖維化，中膜肥厚，外膜增生，叢樣病變及動脈管腔閉塞。在過去20年里包括前列環素和其類似物，內皮素受體拮抗劑，磷酸二酯酶抑制劑在內的幾類新藥已經批準上市，但3年死亡率仍然在40％左右。并且這些治療方案主要針對減輕血管緊張而達到治療效果。因此我們迫切需要研發改善血管重構，延緩肺動脈高壓病程，提高患者生存率為目的的藥物。

優化設計PAH理性治療方案應基于對此疾病細胞分子機理的透徹認識。研究表明肺動脈高壓中存在著BMP二型受體(BMPRII)表達缺陷和Id基因表達下調[Yang J at alCirculation Reserch 2008,102:1212-1221]。恢復生理水平BMP信號,尤其是血管細胞中Id基因的表達是改善血管重構的肺動脈高壓藥物的新靶點之一[Yang J at al Am JPhysiol Lung Cell Mol Physiol 2013 15:305(4):L 312-21]。