[發明專利]一種促進白菜小孢子胚胎發生及直接成苗的方法在審
| 申請號： | 201510469320.6 | 申請日： | 2015-08-04 |
| 公開（公告）號： | CN105028203A | 公開（公告）日： | 2015-11-11 |
| 發明（設計）人： | 馮輝;張露;章云;唐小燕;劉志勇;李承彧;冀瑞琴;王玉剛 | 申請（專利權）人： | 沈陽農業大學 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 沈陽科威專利代理有限責任公司 21101 | 代理人： | 張述學 |
| 地址： | 110866 遼*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 促進 白菜 孢子 胚胎 發生 直接 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種促進白菜小孢子胚胎發生及直接成苗的方法，其特征是包括如下步驟：
（1）游離小孢子培養
采用常規白菜游離小孢子培養方法分離純化小孢子，用含SAHA的濃度為0.025μM~0.10μMNLN培養基培養小孢子，小孢子密度為1×105～2×105個/mLNLN培養基；將每5mL小孢子懸浮液分裝入為60mm×15mm的無菌玻璃培養皿內,每皿添加100μL滅菌后的瓊脂糖0.5g/L、活性炭10g/L的混合液，用石蠟膜封口后，先在33℃恒溫箱中熱激處理1天，再轉至25℃下靜置暗培養，至肉眼可見胚狀體后，再轉移到轉數為50rpm的搖床上繼續暗培養，18天后小孢子發育為子葉型胚狀體；
（2）胚狀體成苗
在接種小孢子后第18天轉接子葉型胚狀體到添加30g·L-1蔗糖，7.5g·L-1瓊脂，0.1g·L-1活性炭的MS培養基上，其pH為5.8～6.0，高溫濕熱滅菌；接種量為每100mL廣口三角瓶含50mL培養基接種5個胚狀體；于25±1℃，16h小時光照/天條件下培養；15～20天后胚狀體發育為根、莖、葉明顯健壯的小苗。
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