[發明專利]一種環境激素檢測裝置及檢測方法有效
| 申請號: | 201510466528.2 | 申請日: | 2015-07-30 |
| 公開(公告)號: | CN105021689B | 公開(公告)日: | 2017-08-11 |
| 發明(設計)人: | 劉英菊;鄭儉鋒;高丹;孫子洪;何祖宇 | 申請(專利權)人: | 華南農業大學;深圳市清時捷科技有限公司 |
| 主分類號: | G01N27/48 | 分類號: | G01N27/48 |
| 代理公司: | 深圳市精英專利事務所44242 | 代理人: | 馮筠 |
| 地址: | 510000 廣*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 環境 激素 檢測 裝置 方法 | ||
1.一種環境激素檢測方法,其特征在于包括如下步驟:
步驟S1,制備聚多巴胺修飾電極,所述電極是絲網印刷碳電極;
步驟S2,抗原固定:在電極表面滴加抗原溶液,恒溫恒濕反應后,用稀釋液沖洗干凈,之后用氮氣吹干;
步驟S3,剩余活性位點封閉:在電極上滴加封閉液,恒溫恒濕反應后,用稀釋液沖洗干凈,之后用氮氣吹干;
步驟S4,免疫反應:在電極上滴加第一抗體,恒溫恒濕孵育后,用稀釋液沖洗干凈,之后用氮氣吹干;
步驟S5,二抗標記:在電極上滴加第二抗體,恒溫恒濕反應后,用稀釋液沖洗干凈,之后用氮氣吹干;
步驟S6,在氰醌/H2O2體系下進行電化學測試,在分析杯中加入1mM的氰醌緩沖液10mL,以0.1V/s的掃描速度在-0.6V到0.8V范圍內進行循環伏安掃描1圈,記錄還原峰的電流,然后加入預定量的H2O2,磁力攪拌5秒,在相同的參數下以0.1V/S的速度進行伏安掃描1圈,并記錄還原峰電流,計算得出加入H2O2前后的還原峰電流的變化量;
步驟S7,制備標準曲線;
步驟S8,水樣測試:通過標準曲線法對待測溶液中的待測物含量進行檢測。
2.如權利要求1所述的環境激素檢測方法,其特征在于,所述步驟S1中,用去離子水將電極的表面沖洗干凈并用氮氣吹干,接著把電極浸泡到1/15M PBS中,在恒電位+1.7V下活化4min后水洗、吹干,之后在電極上滴加1.0mg/ml的多巴胺溶液5μL,在37℃溫度下反應至溶液完全干透。
3.如權利要求1所述的環境激素檢測方法,其特征在于,所述步驟S2至步驟S5中,所述抗原溶液、封閉液、第一抗體和第二抗體的計量均為5μL,所述恒溫恒濕的條件為37℃下持續1小時,所述稀釋液為PBST抗體稀釋液。
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