[發明專利]一種快速定量檢測病人血液中百草枯濃度的方法

在審

• 申請號: 201510464217.2
• 申請日: 2015-08-01
• 公開（公告）號: CN105067548A
• 公開（公告）日: 2015-11-18
• 發明（設計）人: 梁秦
• 申請（專利權）人: 陜西博世康醫藥科技有限公司
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N1/28;G01N1/38
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種快速定量檢測血液中百草枯濃度的方法，其特征在于，由除蛋白試劑I和試劑Ⅱ，溶劑Ⅲ和百草枯標準品Ⅳ組成，所述試劑I為乙腈，試劑II為20%三氯醋酸溶液，溶劑Ⅲ為雙蒸水。

2.根據權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，除蛋白試劑I乙腈和試劑Ⅱ20%的三氯乙酸與血清的比例按照三者體積比1∶1.3∶6，即600μL的樣品血清加100μL的乙腈和130μL的20%三氯乙酸溶液，才能達到最好的除蛋白效果。

3.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，還包括百草枯血清校準品，濃度為2-4μg/mL，以健康人血清為基質配制；當檢測系統或檢測試劑發生改變時，用百草枯血清校準品來校準儀器。

4.權利要求1所述的檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)標準曲線繪制配制500μg/mL的百草枯標準溶液，將其用健康人血清逐級稀釋為10、5、2.5、1、0.2、0.08、0.005μg/mL的百草枯溶液，與乙腈和20%三氯乙酸溶液按照三者體積比6∶1∶1.3混勻，以12000r/min離心10min，取100μL上清液，加1900μL蒸餾水稀釋，12000r/min離心10min取上清，以蒸餾水為空白對照，采用紫外分光光度法進行測定，在257nm測定吸光度值(y)并對質量濃度(x)進行回歸，得線性回歸方程y=0.0935x+0.2964，其相關系數為R²=0.9955；

2)樣品的檢測

①取離心好的樣品血清600μL，先加入除蛋白試劑溶劑I100μL，再加入配好的試劑Ⅱ130μL，輕輕混勻；12000r/min離心10min；

②取上清液，以蒸餾水調零，在257nm波長下用紫外分光光度儀（或全自動/半自動生化分析儀、酶標儀等）測定吸光度，代入上述方程y=0.0935x+0.2964，得樣品血清中百草枯濃度(μg/mL)。