[發明專利]一種培育廣譜、持久穗瘟抗性水稻育種材料的方法

有效

• 申請號: 201510460914.0
• 申請日: 2015-07-30
• 公開（公告）號: CN104969855B
• 公開（公告）日: 2017-05-17
• 發明（設計）人: 李愛宏;吳云雨;戴正元;余玲;潘存紅;肖寧;李育紅;張小祥;周長海;黃年生;趙步洪;季紅娟;劉曉靜;蔣敏
• 申請（專利權）人: 江蘇里下河地區農業科學研究所
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/04
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司32218
• 代理人: 傅婷婷,夏平

1.一種培育廣譜、持久穗瘟抗性育種材料的方法，其特征包含以下具體步驟：

(1)輪回親本分別與抗性基因供體谷梅4號和K3雜交，獲得雜交F₁代，分別以F₁-Pigm、F₁-Pi54表示；其中谷梅4號攜帶的抗性基因為Pigm，K3攜帶的抗性基因為Pi54；

(2)種植F₁-Pigm和F₁-Pi54種子，開花期分別與輪回親本回交得到回交1代，分別以BC₁F₁-Pigm和BC₁F₁-Pi54表示；

(3)種植BC₁F₁-Pigm、BC₁F₁-Pi54種子，在苗期提取各BC₁F₁分離群體中單株DNA，并利用與目標基因緊密連鎖的分子標記進行PCR檢測，選擇含有Pigm和Pi54且農藝性狀和輪回親本相似的雜合型單株在開花期繼續與輪回親本雜交獲得BC₂F₁分離群體，并以BC₂F₁-Pigm和BC₂F₁-Pi54表示；

(4)重復步驟(3)，直至回交6代，獲得BC₆F₁-Pigm和BC₆F₁-Pi54并進行種植，苗期提取各BC₆F₁分離群體中單株DNA，并利用與目標基因緊密連鎖的分子標記進行PCR檢測，分別選擇含有Pigm和Pi54基因的BC₆F₁雜合型單株在開花期進行聚合雜交，獲得高質量雜種F₁種子，并以BC₆F_1-Pigm/Pi54表示；

(5)種植BC₆F_1-Pigm/Pi54群體，苗期提取分離群體中各單株DNA，并利用與目標基因緊密連鎖的分子標記進行PCR檢測，選擇同時含有Pigm和Pi54基因的雜合型單株收獲種子，獲得雙基因的BC₆F₂代群體，以BC₆F_2-Pigm/Pi54表示；

(6)將BC₆F_2-Pigm/Pi54種植成1000株以上的群體規模，在苗期提取分離群體中單株的DNA，并利用與目標基因緊密連鎖的分子標記繼續進行PCR檢測，選擇Pigm和Pi54雙基因純合且農藝性狀和輪回親本最為相似的單株；

(7)收獲Pigm和Pi54雙基因純合的目標單株種子種植成BC₆F₃株系，開展穗瘟抗性的人工接種和病圃自然誘發鑒定，同時開展農藝性狀評價；選擇人工接種和病圃自然誘發鑒定中均表現抗病、且基本農藝性狀與輪回親本無明顯差異的株系，獲得穗瘟抗性得到改良的育種材料。

2.根據權利要求1所述的一種培育廣譜、持久穗瘟抗性育種材料的方法，其特征在于：與目標基因Pigm緊密連鎖的分子標記為ZJ58.7，與目標基因Pi54緊密連鎖的分子標記為M11.54。

3.根據權利要求2所述的一種培育廣譜、持久穗瘟抗性育種材料的方法，其特征在于：分子標記ZJ58.7正向引物如SEQ ID NO.1所示，反向引物如SEQ ID NO.2所示。

4.根據權利要求2所述的一種培育廣譜、持久穗瘟抗性育種材料的方法，其特征在于：分子標記M11.54正向引物如SEQ ID NO.3所示，反向引物如SEQ ID NO.4所示。

5.根據權利要求1～4中任一項所述的一種培育廣譜、持久穗瘟抗性育種材料的方法，其特征在于：所述的輪回親本為優良常規品種或兩系雜交稻親本揚稻6號。