[發(fā)明專利]一種去除紅細胞處理液及用途

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201510456469.0
• 申請日: 2015-07-30
• 公開（公告）號: CN105092328B
• 公開（公告）日: 2019-01-04
• 發(fā)明（設計）人: 張國鋒;顏珊;張恩思
• 申請（專利權）人: 廈門寶太生物科技有限公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 廈門市精誠新創(chuàng)知識產(chǎn)權代理有限公司 35218
• 代理人: 方惠春

本發(fā)明公開了一種去除紅細胞處理液及用途。由占總體積15%?30%的醇類、5?10g/L氯化鈉、0.01?0.1M磷酸鹽緩沖液、1?5g/L冰醋酸、1?5g/L抗凝劑、1?6g/L表面活性劑和雙蒸水組成。本發(fā)明所述去除紅細胞處理液，成本低廉，安全，能盡可能的降低對細胞的損害，能在去除紅細胞的同時保證病理細胞的完整性。采用本發(fā)明所述去除紅細胞處理液處理細胞，只裂解紅細胞和清除血紅蛋白，對病變細胞和正常細胞無損害，最大程度保留病變細胞，維持細胞形狀，制片效果好，背景簡單，清晰，很容易判斷結果。

技術領域

本發(fā)明涉及細胞生物技術領域，尤其涉及一種去除紅細胞處理液及用途。

背景技術

臨床上皮組織取樣時，取樣不慎或者取樣部位損傷導致出血，就形成血性樣本，腹水細胞學檢查時，在抽取腹水過程必然帶有大量血液，也會形成血性樣本。支氣管等部位灌洗取樣過程，也有可能出血，也會形成血性樣本，血性樣本在制片過程嚴重影響觀察，主要表現(xiàn)在：血紅細胞大量貼附在制片區(qū)，甚至覆蓋病理細胞，影響病理細胞的判讀、血紅細胞碎片凝集的小團塊通過過濾網(wǎng)，貼附在制片區(qū)，影響病理細胞的判讀、被染液染色過的血紅蛋白粘附于玻片上。造成背景復雜，影響病理細胞判讀。因此能否處理血紅細胞成了血性樣本制片成功的關鍵。目前臨床上普遍采用高濃度的冰醋酸來處理，主要方式有：1、直接向保存液中加入一定比例的冰醋酸，裂解后離心，再向沉渣中加入冰醋酸，重復離心，達到去除紅細胞的效果；2、用酒精和冰醋酸混合物來裂解紅細胞，處理方法同第一種方式；3、用溶血劑來裂解紅細胞，采用帶有氰化鉀的裂解液，處理方法同第一種。

三種方法中，方法1和方法2主要特點都是靠加入大量的冰醋酸來達到裂解紅細胞的效果，裂解完全，但是大量的高濃度冰醋酸會將一部分的正常細胞，以及病變細胞也一同裂解，因此在去除紅細胞的同時可能會因為病變細胞也被裂解而造成漏檢。同時不同取樣部位的細胞可能因為高濃度的冰醋酸造成過酸而裂解。方法3采用溶血劑來裂解紅細胞，目前市售的溶血劑有較強的溶血效果，但是含有氰化鉀劇毒成分，對操作者和環(huán)境都是一種很大的威脅。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一種高效、無毒、專一且成本低的去除紅細胞處理液。

為實現(xiàn)上述目的， 本發(fā)明提供一種去除紅細胞處理液，其特征在于，由醇類、氯化鈉、磷酸鹽緩沖液、抗凝劑、表面活性劑、冰醋酸和雙蒸水組成 。

進一步，所述醇類占處理液總體積15%-30%，氯化鈉含量為5-10g/L、磷酸鹽緩沖液0.01-0.1M，抗凝劑含量為1-5g/L，表面活性劑含量為1-6g/L，冰醋酸1-5g/L，雙蒸水補充不足的處理液體積。

進一步，所述醇類占處理液總體積20%-25%，氯化鈉含量為8-9g/L、磷酸鹽緩沖液0.05-0.1M，抗凝劑含量為2-4g/L，表面活性劑含量為3-5g/L，冰醋酸3-5g/L，雙蒸水補充不足的處理液體積。

進一步，所述醇類為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇中的一種或任意一種以上，質量濃度為95%-100%。

進一步，所述磷酸鹽緩沖液為2.2g磷酸氫二鈉和0.1g磷酸二氫鈉定容1L組成的0.1MPB緩沖溶液，其以下使用濃度可用上述配制溶液稀釋而成。

進一步，所述抗凝劑是乙二胺四乙酸二鈉。

進一步，所述表面活性劑為吐溫-20、吐溫-80、十六烷三甲基氯化銨、十六烷二甲基芐基氯化銨、十六烷基三甲基溴化銨的一種或一種以上的組合物。

另一方面，本發(fā)明保護所述去除紅細胞處理液用于去除細胞樣品中的血紅細胞成分的用途。

進一步， 10ml細胞樣品與去除紅細胞處理液的體積比為10:6。