[發明專利]一種治療骨關節炎的細胞制劑及其制備方法

有效

• 申請號: 201510453601.2
• 申請日: 2015-07-29
• 公開（公告）號: CN104958320A
• 公開（公告）日: 2015-10-07
• 發明（設計）人: 田磊
• 申請（專利權）人: 西安芙金細胞科技有限公司
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61P19/02;A61P19/08;A61K35/16
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技術領域

本發明屬于組織工程學細胞治療領域，具體涉及一種治療骨關節炎的細胞制劑及其制備方法。

背景技術

由于年齡增長、超重、免疫系統異常、關節不穩、外傷等原因所導致的關節炎已經成為影響人們正常工作生活甚至致殘的重要原因。數據顯示，在30歲以上的人群中，骨性關節炎的患病率超過6%，且隨著年齡的增長該比例逐漸提高。據估計，中國的骨關節炎患者超過1億人。

目前針對關節炎主要的治療目標是：1，減輕疼痛、腫脹；2、改善肌肉力量、關節營養、血液循環、關節潤滑；3、延緩關節軟骨退變、保留關節功能或生活質量。

傳統的治療方法包括保守治療和關節置換。保守治療通常包括理療、藥物治療等，可以短期緩解癥狀，但是治標不治本，并未實現損傷區域的修復，長期效果不佳，病情容易反復。

關節置換是用人工制造的關節代替疼痛且喪失關節功能的關節的方法，一般應用于較為嚴重的骨壞死、粉碎性骨折脫位不能復位者、疼痛及活動障礙的骨關節病、僵直或活動困難的類風濕性關節炎以及骨腫瘤等。關節置換存在假體松動、磨損或折斷、深部感染、異物反應以及妨礙活動的軟組織鈣化等并發癥。

隨著組織工程與再生醫學領域的發展，關于組織修復與再生的研究也逐漸增多。間充質干細胞廣泛存在于骨髓、脂肪、肝臟、外周血、臍帶、臍血等組織中，具有高度自我更新能力及多向分化潛能，因而被廣泛開發和應用。

專利號為ZL02815834.2的中國發明專利，公開了一種用于治療關節軟骨損傷、損害或缺陷的組合物。由從臍帶血分離、增殖和/或分化而來的細胞組分、培養介質和生物相容性聚合物組成。

專利申請號為201010152461.2的中國發明專利申請，公開了一種用于治療骨損傷的細胞注射劑及其制備方法，由自體骨髓來源的間充質干細胞和溫敏型凝膠及自體血液分離提取的有效營養因子組成的復合物。

上述專利或專利申請文件中記載的復合的生物相容性聚合物或溫敏凝膠植入體內后形成半固體或凝膠狀，不利于間充質干細胞在關節腔內的分散，阻礙了通過干細胞的免疫調節功能來改善關節腔微環境的過程；在細胞的應用上，專利申請號為201010152461.2的申請文件中僅包含了間充質干細胞或軟骨細胞單一的細胞類型，單純應用間充質干細胞具有旁分泌、調節免疫功能，但是組織修復需要通過體內的誘導分化來實現，因此治療所需時間較長；而單純應用誘導后的間充質干細胞細胞進行治療，僅具有組織修復功能，并不具備抗炎因子分泌功能，不利于關節炎的修復。

專利號為ZL201210410047.6的中國專利，公開了一種誘導間充質干細胞向軟骨細胞分化的方法及其在骨關節炎中的應用，該發明使用小球法誘導培養間充質干細胞分化為無支架軟骨，使用時將該軟骨消化制備成軟骨細胞懸液進行關節內注射。該專利仍然存在使用單一誘導分化后間充質干細胞的問題，此外誘導過程所需時間長，形成的無支架軟骨結構緊密，內部細胞容易出現凋亡。

綜上所述，不難看出目前應用于關節炎治療的細胞制劑細胞類型單一，不能充分發揮細胞的生物學性能，誘導分化方法效率較低。

發明內容

本發明的目的是克服現有關節炎治療制劑或方法存在細胞制劑細胞類型單一、治療時間長、不能充分發揮細胞的生物學性能，誘導分化效率較低等不利于關節炎的恢復的問題。

為此，本發明提供了一種治療骨關節炎的細胞制劑，該細胞制劑適用于骨關節炎疾病中炎癥的緩解和受損組織的修復，實現患者癥狀的緩解和功能的恢復。

上述治療骨關節炎的細胞制劑，由間充質干細胞、向軟骨方向誘導分化的間充質干細胞、富含血小板血漿及分散介質組成。

上述間充質干細胞來源是骨髓間充質干細胞、脂肪間充質干細胞、外周血間充質干細胞、滑膜間充質干細胞、臍帶間充質干細胞和臍帶血間充質干細胞中的任一種。

上述細胞制劑的終細胞濃度為10⁵～10⁸/ml，其中，所述間充質干細胞與所述誘導分化后的間充質干細胞比例為0.25:1～4:1。

上述富含血小板血漿中血小板濃度在1～2×10⁶/μl之間。

上述富含血小板血漿與分散介質的體積比在0.5:1～2:1。

上述分散介質是MEM、DMEM、D/F12、α-MDM、IMDM、BME、RPMI?1640和McCoy's?5A培養基中的任一種。

同時，本發明提供了一種制備上述治療骨關節炎的細胞制劑的方法，包括以下步驟：