[發明專利]一種肺癌易感基因無創檢測試劑盒

在審

• 申請號: 201510445847.5
• 申請日: 2015-07-27
• 公開（公告）號: CN105018619A
• 公開（公告）日: 2015-11-04
• 發明（設計）人: 張曉晶;沈挺;宋毅;費云舟
• 申請（專利權）人: 寧波美晶醫療技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所 31233
• 代理人: 黃志達

技術領域

本發明屬于肺癌易感基因領域，特別涉及一種肺癌易感基因無創檢測試劑盒。

背景技術

肺癌目前是全世界最主要的癌癥死亡原因。2003年世界衛生組織(WHO)公布的死亡率是110萬/年，發病率是120萬/年。多發生在40歲以上，發病年齡高峰在60-79歲之間。男女患病率為2.3:1。肺癌的危害因素主要包括吸煙、大氣污染、電離輻射及遺傳因素等。

所謂疾病易感性是指由遺傳決定的易于患某種或某類疾病的傾向性。具有疾病易感性的人一定具有特定的遺傳特征，簡單地說就是帶有某種疾病的易感基因組型。

目前針對肺癌單個易感基因檢測的研究成果已經很多，但是不同研究的具體基因位點與肺癌易感的關聯度強弱不一，并且個別基因位點尚不能較為準確地評價肺癌易感程度。

CN200610116093.X公開了一種通過PARP1基因、CYP1A1基因和XRCC1基因檢測肺癌易感性的試劑盒，通過三個基因的檢測尚不能全面準確地評價肺癌易感程度。

因此需要一種能更為全面、準確評估肺癌易感程度的基因檢測方法，對與肺癌易感關聯度高的一些基因位點進行檢測。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種肺癌易感基因無創檢測試劑盒，該試劑盒可以同時檢測肺癌易感基因的多個區域，準確得出這些區域的序列信息，根據各基因位點突變的綜合信息，結合易感風險度評估方法計算出肺癌的風險，檢測靈敏度高，并能進一步同時對大量樣品檢測。

本發明的一種肺癌易感基因無創檢測試劑盒，所述試劑盒包括多個肺癌易感基因的特異性擴增引物混合液、測序引物和PCR擴增試劑預混物；其中，特異性擴增引物為(方向為5’-3’端)：

CYP1A1：AGCTCCACTCACTTGACAC和AGGCTGAACCTTAGACCACA；

CYP2E1：ACATTGTCAGTTCTCACCTCG和ACACAATAGAGCTCCACATTGACT；

NAT2：ATTTTTACATCCCTCCAGTT和CTGATAGCACATAAGTTGAT；

ERCC2：CCCGCTCTGGATTATACGGA和TTCATAAGACCTTCTAGCACCA；

XRCC1：AGATCACACCTAACTGGCAT和CCGCTCCTCTCAGTAGTCT；

GSTP1：CTCATCCTTCCACGCACATCC和CCCCATGACCCGTTACTTGGC；

GSTM1：GAACTCCCTGAAAAGCTAAAGC和GTTGGGCTCAAATATACGGTGG；

GSTT1：TTCCTTACTGGTCCTCACATCTC和TCACCGGATCATGGCCAGCA。

所述多個肺癌易感基因的檢測位點分別為：CYP1A1rs1048943；CYP2E1rs3813867和rs2031920；NAT2rs1799929、rs1799930和rs1799931；ERCC2rs13181；XRCC1rs25487；GSTP1rs1695。

所述測序引物的序列如下(方向為5’-3’端)：

CYP1A1：CTGTCTCCCTCTGGTTACAGGAAG；

CYP2E1：TGGTTCAGGAGAGGTGCAGTG；

NAT2：GATGTGGCAGCCTCTAGAAT；

ERCC2：TCAAACATCCTGTCCCTACTG；

XRCC1：ACCAGCTGTGCCTTTGCCAAC；

GSTP1：AGTGACTGTGTGTTGATCAG；

GSTM1與GSTT1基因多態性為大片段插入/缺失多態性，若缺失，其PCR擴增產物凝膠電泳無條帶。

所述PCR擴增試劑預混物包括DNA聚合酶和PCR擴增buffer。

所述試劑盒還包括PCR產物凝膠回收試劑。

有益效果

本發明可以同時檢測肺癌易感基因的多個區域，準確得出這些區域的序列信息，根據各基因位點突變的綜合信息，結合易感風險度評估方法計算出肺癌的風險，檢測靈敏度高，并能進一步同時對大量樣品檢測。

具體實施方式