[發明專利]一種基因工程好氧硝化細菌及其構建方法和在處理高濃度氨氮污水中的應用

在審

• 申請號: 201510442968.4
• 申請日: 2015-07-24
• 公開（公告）號: CN105018404A
• 公開（公告）日: 2015-11-04
• 發明（設計）人: 白福良;田輝;劉志鵬;劉德濱
• 申請（專利權）人: 哈爾濱南森生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/75;C02F3/34;C12R1/01;C02F101/38
• 代理公司: 上海新天專利代理有限公司 31213
• 代理人: 胡紅芳

1.一種基因工程好氧硝化細菌，其特征在于，所述基因工程好氧硝化菌是Biodeammonianitrogen工程菌，拉丁文學名為Brevibacillus?reuszeri，在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的保藏編號為CMGCC?No.10254。

2.根據權利要求1所述的基因工程好氧硝化細菌，其特征在于，所述基因工程好氧硝化細菌中轉化的外源基因的核苷酸序列如序列編號1和2所示。

3.根據權利要求1或2所述的基因工程好氧硝化細菌，其特征在于，所述基因工程好氧硝化細菌的氨單加氧酶基因和羥胺氧化酶的氨基酸序列如序列編號3和4所示。

4.根據權利要求3所述的基因工程好氧硝化細菌，其特征在于，所述基因工程好氧硝化細菌的氨單加氧酶基因前帶有分泌型信號肽，其中信號肽的氨基酸序列如編號5所示。

5.權利要求1至4任一所述的基因工程好氧硝化細菌的構建方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)利用細菌分離技術分離具有氨氮去除效果的硝化細菌基因組；

(2)利用PCR技術克隆氨單加氧酶基因和羥胺氧化酶，與pSIM6載體連接后重組至步驟(1)的好氧硝化細菌基因組的特定位點中；

(3)利用基因工程技術從步驟(2)的產物中篩選出表達氨單加氧酶和羥胺氧化酶基因的好氧硝化細菌；

(4)將步驟(3)的產物在高濃度氨氮條件下馴化，得到具有處理高濃度氨氮污水能力的基因工程好氧硝化細菌；

(5)利用發酵技術將步驟(4)所述具有處理高濃度氨氮污水能力的基因工程硝化細菌進行擴增，得到所述基因工程好氧硝化細菌。

6.權利要求1至4任一所述的基因工程好氧硝化細菌的應用，其特征在于，將膜生物反應系統與所述基因工程好氧硝化細菌聯合，在高濃度氨氮條件下，有效去除污水中的高濃度氨氮；

所述膜生物反應系統為流動的需氧膜生物反應系統，膜的材質為樹脂；

所述高濃度氨氮在所述污水中的含量是3000～6000mg/L。

7.根據權利要求6所述的基因工程好氧硝化細菌的應用，其特征在于，所述污水中COD的去除率為98.44～99.84％。

8.根據權利要求6所述的基因工程好氧硝化細菌的應用，其特征在于，所述污水中氨氮去除率為98.86～99.94％。

9.根據權利要求6～8任一所述的基因工程好氧硝化細菌的應用，其特征在于，所述污水包括生活污水、工業廢水、垃圾滲濾液以及高濃度氨氮廢水。