[發(fā)明專利]一種機(jī)械通氣肺損傷的早期診斷方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510439810.1
• 申請(qǐng)日: 2015-07-23
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104975102A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-10-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 郭永清;張瑋瑋;衛(wèi)建峰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 郭永清
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;G01N33/58;G01N15/14
• 代理公司: 重慶百潤(rùn)洪知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 50219
• 代理人: 劉立春

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及機(jī)械通氣肺損傷早期診斷領(lǐng)域，尤其涉及一種機(jī)械通氣肺損傷的早期診斷方法。

背景技術(shù)

在對(duì)急性肺損傷(acute?lung?injury,ALI)和急性呼吸窘迫綜合癥(acute?respiratory?distress?syndrome,ARDS)引起的呼吸功能衰竭的治療過(guò)程中，機(jī)械通氣(mechanical?ventilation,MV)是必不可少的手段之一，并且在手術(shù)全麻過(guò)程中經(jīng)常用到機(jī)械通氣。但是機(jī)械通氣會(huì)帶來(lái)負(fù)面作用，它會(huì)加劇原有肺臟的損傷甚至可以誘發(fā)健康的肺臟產(chǎn)生損傷，此類現(xiàn)象被稱為機(jī)械通氣肺損傷(ventilator-induced?lung?injury,VILI)。一般而言，VILI早期出現(xiàn)機(jī)械性損傷，隨后以炎癥細(xì)胞、細(xì)胞因子介導(dǎo)的生物傷為主。機(jī)械性損傷可以造成生物傷，生物傷也可以加重機(jī)械性損傷。現(xiàn)有技術(shù)中，VILI早期情況不易診斷，往往耽誤了最佳的治療時(shí)機(jī)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種機(jī)械通氣肺損傷的早期診斷方法，解決現(xiàn)有技術(shù)中VILI早期情況不易診斷的技術(shù)問(wèn)題。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種機(jī)械通氣肺損傷的早期診斷方法，包括：

獲取肺上皮細(xì)胞組織，并將所述肺上皮細(xì)胞組織置于RPMI-1640培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；

測(cè)定纖溶酶原激活物抑制劑-1PAI-1的表達(dá)情況；

根據(jù)所述PAI-1的表達(dá)情況，對(duì)機(jī)械通氣肺損傷進(jìn)行診斷。

本發(fā)明提供一種機(jī)械通氣肺損傷的早期診斷方法，通過(guò)獲取肺上皮細(xì)胞組織，并將所述肺上皮細(xì)胞組織置于RPMI-1640培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，測(cè)定纖溶酶原激活物抑制劑-1PAI-1的表達(dá)情況，根據(jù)所述PAI-1的表達(dá)情況，對(duì)機(jī)械通氣肺損傷進(jìn)行診斷。本發(fā)明以PAI-1作為監(jiān)測(cè)機(jī)械通氣肺損傷的生物指標(biāo)，能夠?qū)C(jī)械通氣肺損傷進(jìn)行早期診斷。

附圖說(shuō)明

為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，顯而易見(jiàn)地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)性的前提下，還可根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為本發(fā)明實(shí)施例提供的一種機(jī)械通氣肺損傷的早期診斷方法的流程圖。

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點(diǎn)能夠更加明顯易懂，下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。

本發(fā)明實(shí)施例提供了一種機(jī)械通氣肺損傷的早期診斷方法，如圖1所示，包括：

步驟101、獲取肺上皮細(xì)胞組織，并將所述肺上皮細(xì)胞組織置于RPMI-1640培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)；

其中，將所述肺上皮細(xì)胞組織培養(yǎng)于RPMI1640中，并將培養(yǎng)基置于CO2孵箱內(nèi)培養(yǎng)和加載，其中，孵箱溫度為37℃，CO2含量5％。

步驟102、測(cè)定纖溶酶原激活物抑制劑-1PAI-1的表達(dá)情況；

其中，纖溶酶原激活物抑制劑-1(plasminogen?activator?inhibitor-1,PAI-1)是尿激酶型纖溶酶原激活物(urokinase?type?plasminogen?activator,uPA)的主要抑制物，PAI-1、uPA以及其尿激酶型纖溶酶原激活物受體uPAR(urokinase?type?plasminogen?activator?receptor)一起構(gòu)成了細(xì)胞周圍的纖溶系統(tǒng)，三者之間相互作用并接受其他細(xì)胞因子表達(dá)的影響，從而精確調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)沉積和降解的動(dòng)態(tài)平衡。PAI-1除了其傳統(tǒng)的調(diào)節(jié)細(xì)胞外纖溶功能以外，還可以調(diào)節(jié)細(xì)胞粘附、運(yùn)動(dòng)、分化、增殖，在機(jī)體免疫和炎癥及感染的控制方面有著重要的作用。本發(fā)明基于這一原理，將PAI-1作為檢測(cè)VILI的敏感指標(biāo)，機(jī)械通氣產(chǎn)生PAI-1，并激活I(lǐng)L-8、引起其下游炎性因子聚集，最終導(dǎo)致肺上皮細(xì)胞形態(tài)學(xué)發(fā)生改變，造成肺部損傷。

步驟102中測(cè)定纖溶酶原激活物抑制劑-1PAI-1的表達(dá)情況，可以采用多種方法，包括：

1、細(xì)胞免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)