[發(fā)明專(zhuān)利]一種近紅外激光觸發(fā)的復(fù)合納米制劑的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510432200.9
• 申請(qǐng)日: 2015-07-22
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104984341B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-10-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜斌;韓淑萍;趙飛飛;蘇湘潔;王宇輝;曹小會(huì);屈甜甜
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 鄭州大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): A61K41/00
• 分類(lèi)號(hào): A61K41/00;A61K49/00;A61K49/06;A61K31/337;A61K47/36;A61K47/02;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州天陽(yáng)專(zhuān)利事務(wù)所(普通合伙)41113
• 代理人: 聶孟民

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是一種近紅外激光觸發(fā)的復(fù)合納米制劑的制備方法。

背景技術(shù)：

C₆₀，具有獨(dú)特大小(直徑約為0.71 nm)與中空球形32面體結(jié)構(gòu)，其外表面分布著30個(gè)π電子組成的大π鍵，易于修飾，含有π電子的分子可通過(guò)π電子堆積吸附在C₆₀表面。C₆₀上連接一種造影劑后，表面仍存在π電子，對(duì)含π電子的化合物依然具有較強(qiáng)作用力。利用這種特性，可以構(gòu)建一種近紅外激光觸發(fā)的復(fù)合納米制劑。同時(shí)，C₆₀在可見(jiàn)光照射下產(chǎn)生氧自由基、切割DNA的作用，表現(xiàn)出顯著的細(xì)胞毒特性，且光毒性隨照射時(shí)間和C₆₀濃度增加而增強(qiáng)，表明C₆₀ 可作為光敏劑用于腫瘤治療。

上轉(zhuǎn)換納米顆粒 (UCNP_S) 是一類(lèi)利用近紅外光(通常為980nm) 激發(fā)、短波長(zhǎng)發(fā)射的熒光材料，能克服有機(jī)染料光學(xué)穩(wěn)定性差，半導(dǎo)體量子點(diǎn)易引發(fā)較強(qiáng)背景熒光的缺點(diǎn)而備受關(guān)注，將其應(yīng)用在生物標(biāo)記領(lǐng)域時(shí)，具有窄帶發(fā)射，較大的反斯托克斯位移，較深的組織穿透深度和空間分辨率，對(duì)組織的損傷較小且不會(huì)產(chǎn)生自發(fā)熒光等優(yōu)點(diǎn)，核殼式上轉(zhuǎn)換熒光材料的熒光靈敏度更高。

超順磁性氧化鐵納米顆粒作為一種新型磁共振T2場(chǎng)成像對(duì)比劑，可用于選擇性增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的磁共振成像，對(duì)腫瘤病變的成像效果好，能提高圖像的清晰度，安全性高，在癌癥的早期診斷中具有重要意義。100nm以下的磁性材料進(jìn)入體內(nèi)后可選擇性濃集于靶器官并滯留一段時(shí)間，使成像組織的弛豫速率比背景部位改變更大，提高磁共振成像（MRI）診斷的效果。在C₆₀表面通過(guò)化學(xué)修飾，連接上轉(zhuǎn)換納米熒光劑和超順磁性氧化鐵納米粒，并荷載化療藥物DTX，可構(gòu)建具有磁靶向性的光/磁雙模態(tài)成像診斷治療藥物。

聚合物膠束的臨界膠束濃度低，解離速度慢，能實(shí)現(xiàn)體內(nèi)長(zhǎng)循環(huán)，同時(shí)可包載難溶性藥物并具有較高的載藥量，常作為藥物控釋、靶向給藥系統(tǒng)的載體使用。近年來(lái)，光敏膠束因其能在光照條件下，可控制藥物的釋放，提高治療效果而被視為一種具有應(yīng)用前景的新型藥物轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，在醫(yī)藥領(lǐng)域得到越來(lái)越廣泛的重視。然而，紫外光照射對(duì)組織的損傷，限制了光敏膠束在制劑中的應(yīng)用，而C₆₀雖可在可見(jiàn)光照射下產(chǎn)生活性氧，從而殺死腫瘤細(xì)胞，但因可見(jiàn)光的穿透性差而使其應(yīng)用受限。

發(fā)明內(nèi)容：

針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，本發(fā)明的目的就是提供一種近紅外激光觸發(fā)的復(fù)合納米制劑的制備方法，利用近紅外980nm激光照射該納米制劑，借助其中上轉(zhuǎn)換納米粒的發(fā)射光觸發(fā)光敏膠束釋放藥物，達(dá)到診斷治療的目的，解決可見(jiàn)光穿透能力差，診斷治療二次服藥的問(wèn)題；

本發(fā)明解決的技術(shù)方案是采用近紅外光980nm激光照射深層組織，使C₆₀產(chǎn)生活性氧，避免紫外光照射引起膠束破膜釋藥對(duì)組織造成的損傷，對(duì)腫瘤的治療更加精準(zhǔn)，安全，有效。據(jù)此本發(fā)明解決的技術(shù)方案，包括以下步驟：

（1）將C₆₀進(jìn)行磁性修飾，形成C₆₀-Fe₃O₄，所述的四氧化三鐵和C₆₀的重量比為（1-10）:1，方法是：將50mg C₆₀溶于50ml甲苯，加0.5g氫化鈉，超聲溶解，加入0.1-0.5ml溴代丙二酸二乙酯，15-25℃在N₂保護(hù)下攪拌5h，過(guò)濾除去氫化鈉，旋蒸除去甲苯，真空干燥12h，得C₆₀丙二酸酯衍生物，將C₆₀丙二酸酯衍生物溶于30ml甲苯中，加入380mg氫化鈉，80℃在N₂保護(hù)下油浴反應(yīng)10h（即甲苯相無(wú)色）；除去甲苯，加20ml濃鹽酸過(guò)濾，得濾餅，將濾餅溶于50ml甲醇中，過(guò)濾除去甲醇不溶物，旋蒸除去甲醇，50℃真空干燥得丙二酸取代的C₆₀-COOH；