[發明專利]一種基于WDR5基因用于結直腸癌輔助診斷的試劑盒

有效

• 申請號: 201510428879.4
• 申請日: 2015-07-20
• 公開（公告）號: CN104946785B
• 公開（公告）日: 2019-02-12
• 發明（設計）人: 黃文林;談辛
• 申請（專利權）人: 黃文林
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 郭煒綿;陳燕嫻

本發明公開了一種基于WDR5基因用于結直腸癌輔助診斷的試劑盒，包括試劑A和/或試劑B；試劑A是用于檢測WDR5基因表達水平的引物對；試劑B是用于檢測WDR5蛋白含量的試劑，優選抗WDR5蛋白的抗體。本發明通過對結直腸正常組織和癌組織中的WDR5基因mRNA及編碼蛋白的表達水平進行檢測，發現WDR5在癌組織中顯著高表達。在腸癌細胞中過表達WDR5能檢測到，癌細胞表現出更強的遷移能力。基于以上發現開發得到一種用于結直腸癌輔助診斷的試劑盒，其對于更好的了解結直腸癌的發生發展機理，制定結直腸癌風險評估和早期檢測的有效措施具有重要意義。

技術領域

本發明屬于分子診斷領域，具體涉及基于與結直腸癌相關的基因WDR5而開發得到的一種用于結直腸癌輔助診斷的試劑盒。

背景技術

大腸癌(CRC)是胃腸道常見的惡性腫瘤。在西方發達國家，CRC的發病率處于第2位。據國際癌癥研究組織(IARC)提供的數據顯示，亞洲地區，尤其是經濟發達區，CRC的發生率也迅速增長。美國國家癌癥數據庫(US hospital-based oncology database)的研究結果表明，50歲以下成年人的CRC發病率在過去10年內增加了2.1％。美國安德森癌癥研究中心(M.D.Anderson Cancer Center)的Yi Qian Nancy You等人2011年12月12日在《內科學文獻》(Archives of Internal Medicine)上發表《Young-Onset Colorectal Cancer:IsIt Time to Pay Attention》稱，年輕型的CRC的中位發病年齡為44歲，其中72.5％在40歲至49歲發病。

種種現實表明CRC如今已成為常見病。隨著經濟發展，發病率越來越高，且趨于年輕化，對人類的健康有著極大的影響。而影響結直腸癌死亡率最重要的因素是發生轉移，且針對轉移性結直腸癌的治療效率很有限。

腫瘤分子標志物是腫瘤細胞在癌變過程中由于基因的表達水平的變化而增加或減少的抗原和其他生物活性物質，可用于腫瘤的診斷、分期、檢測腫瘤進程，和評定藥物的治療效果；它對腫瘤的臨床治療帶來了巨大的影響，尤其當它能夠在臨床病癥出現之前被檢測到，或者用于治療效果實時監測時，具有更大的意義。同時，腫瘤分子標志物具有敏感，方便，經濟、無創的特征，成為大規模篩查的重要手段。

目前已發現的結直腸癌分子標志物有CEA、CA-199等，但是尚無理想的分子標志物能夠預測腸癌的轉移。因此，尋找找到能夠對結直腸癌特異的，具有提示作用的腫瘤標志物具有重要的意義。

WDR5基因(WD repeat domain 5，Gene ID：11091)能編碼含7個WD模體的蛋白質，文獻報道其編碼蛋白能夠參與多種細胞功能的調節，包括細胞凋亡和轉錄抑制等。WDR5蛋白能夠促進異源三聚體的形成，對脊椎動物的生長，hox基因的激活等具有十分重要的意義。在成骨細胞、軟骨細胞、骨髓基質細胞中表達并加速骨細胞分化，同時它能夠參與細胞自我更新和重編程的過程。因此，它的異常表達可能引起腫瘤的發生發展，在臨床上，也許能夠應用WDR5的表達特征進行診斷預測。

發明內容

本發明的目的在于提供一種用于結直腸癌輔助診斷的試劑盒，該試劑盒能特異性地檢測WDR5基因的表達水平有無上調，作為結直腸癌診斷的依據。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

一種用于結直腸癌輔助診斷的試劑盒，包括試劑A和/或試劑B；

試劑A是用于檢測WDR5基因表達水平的引物對，也即用于在QRT-PCR中定量擴增WDR5特異片段的QRT-PCR引物對，所述引物對為以下引物中的任意一對：

引物對1：其序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示；

引物對2：其序列如SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示；