[發明專利]一種用于啶蟲脒檢測的光電化學傳感器的構建方法和檢測方法

有效

• 申請號: 201510422603.5
• 申請日: 2015-07-17
• 公開（公告）號: CN105004712B
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 方海林;李紅波;李靜;王偉
• 申請（專利權）人: 鹽城工學院
• 主分類號: G01N21/75
• 分類號: G01N21/75
• 代理公司: 南京先科專利代理事務所(普通合伙) 32285
• 代理人: 繆友菊

1.一種用于啶蟲脒檢測的光電化學傳感器的構建方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）在乙醇中調節Zn(Ac)₂·2H₂O和Co(Ac)₂·4H₂O的摩爾比，使得Co²⁺與Zn²⁺的摩爾比為0.5～4.0 %，采用水熱合成法制備鈷摻雜氧化鋅納米粒子；

（2）對ITO導電玻璃進行清洗、沖洗操作并在室溫下晾干；

（3）將鈷摻雜氧化鋅納米粒子分散到水中制備成懸浮液，滴至ITO電極表面，制成鈷摻雜納米氧化鋅薄膜；所述鈷摻雜納米氧化鋅薄膜的制備方法為：將20 μL鈷摻雜氧化鋅懸浮液滴至ITO電極表面，形成直徑為5 mm的圓斑，在飽和氣氛中晾干后得到均勻的薄膜，將薄膜在250~350℃條件下熱處理1小時，冷卻至室溫，得到鈷摻雜納米氧化鋅薄膜；

（4）將濃度為1~3 nmol?L^-1啶蟲脒核酸適配體覆蓋在所述鈷摻雜納米氧化鋅薄膜的表面，制備核酸適配體基鈷摻雜氧化鋅光電化學傳感器；所述核酸適配體基鈷摻雜氧化鋅光電化學傳感器的制備方法為：將10 μL的啶蟲脒核酸適配體覆蓋在鈷摻雜納米氧化鋅薄膜的表面，在35~40℃條件下溫育30分鐘，然后用磷酸鹽緩沖液洗去結合不牢的啶蟲脒核酸適配體，得到核酸適配體基鈷摻雜氧化鋅光電化學傳感器；所述核酸適配體的堿基序列為

5'-TGTAATTTGTCTGCAGCGGTTCTTGATCGCTGACACCATATTATGAAGA-3'。

2.根據權利要求1 所述的用于啶蟲脒檢測的光電化學傳感器的構建方法，其特征在于，步驟（1）中所述鈷摻雜氧化鋅納米粒子的制備方法為：先將 50 ml 1 mol?L^-1的NaOH溶液逐滴加入100 ml Co²⁺與Zn²⁺的摩爾比為0.5～4.0%的Zn(Ac)₂·2H₂O和Co(Ac)₂·4H₂O溶液中，在室溫下磁力攪拌反應30~60分鐘；然后將混合液轉移至高壓反應釜中繼續在110~130℃條件下加熱2小時，冷卻至室溫；最后離心收集沉淀物，用無水乙醇和純水交叉洗滌沉淀物3～5次，洗滌后的沉淀物在110~130℃條件下干燥得到。

3.根據權利要求1或2所述的用于啶蟲脒檢測的光電化學傳感器的構建方法，其特征在于：所述Co²⁺與Zn²⁺的摩爾比為1%。

4.根據權利要求1所述的用于啶蟲脒檢測的光電化學傳感器的構建方法，其特征在于，步驟（2）中對ITO導電玻璃進行清洗使用的清洗劑為氨水、雙氧水和水體積比為1~3:1~3:50的混合溶劑。

5.根據權利要求 1 所述的用于啶蟲脒檢測的光電化學傳感器的構建方法，其特征在于，步驟（3）中所述鈷摻雜氧化鋅納米粒子懸浮液的濃度為0.8～1.2 mg?ml^-1。

6.根據權利要求1所述的用于啶蟲脒檢測的光電化學傳感器的構建方法所制備的光電化學傳感器的檢測方法，其特征在于包括如下步驟：

（1）以啶蟲脒核酸適配體修飾的鈷摻雜氧化鋅電極為光陽電極，建立核酸適配體基光電化學法定量檢測啶蟲脒；

（2）將上述光陽極置于pH為7的磷酸鹽緩沖液中，緩沖液中加入0.1 mol?L^-1槲皮素和啶蟲脒進行測試，記錄加入啶蟲脒后鈷摻雜氧化鋅基光陽極的光電流變化；

（3）根據擬定的啶蟲脒濃度-光電流定量關系方程，測算待測藥物中啶蟲脒的濃度。

7.根據權利要求6所述的用于啶蟲脒檢測的光電化學傳感器的構建方法所制備的光電化學傳感器的檢測方法，其特征在于步驟（2）中加入的槲皮素的體積為30 μL～150 μL。