[發明專利]解剖學內臟標本的長期保存方法

有效

• 申請號: 201510418364.6
• 申請日: 2015-07-16
• 公開（公告）號: CN105052891B
• 公開（公告）日: 2017-03-08
• 發明（設計）人: 方欣;齊瑞芳;高洪波;賈建新;蔡志平;宋嵬;閆旭升
• 申請（專利權）人: 內蒙古科技大學包頭醫學院
• 主分類號: A01N1/00
• 分類號: A01N1/00
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙)11369
• 代理人: 史霞

技術領域

本發明涉及一種解剖學內臟標本的保存方法。更具體地說，本發明涉及一種可長期維持內臟原有外觀形態且于人體無刺激性的解剖學內臟標本的長期保存方法。

背景技術

人體解剖學是研究人體形態結構的一門科學，其與生理學、病理學、藥理學、病原微生物學等基礎醫學及大多數臨床醫學關系密切，在解剖學中標本作為一種直觀的教學工具發揮著重要的作用。

目前在解剖學標本的防腐固定保存液中，福爾馬林溶液是常用的一種化學試劑，其穿透力強，對器官組織的固定硬化程度高，可有效保持標本的原有形態，并且殺菌能力強，可抑制霉菌的生長。但福爾馬林溶液也有著明顯的缺陷，其所固定保存的組織標本易發硬變脆，肌肉纖維易被拉斷，不利于后續的解剖研究操作，而且還有強烈的刺激性，對眼結膜、呼吸道粘膜及經常接觸的皮膚均有一定的損害，直接危害著解剖教學人員的身體健康。

此外，在內臟組織尤其是含氣組織標本的制作過程中，內臟內部空氣的殘留，會使組織結構得不到徹底的固定而導致的后期組織結構變形問題，影響了對內臟組織正常形態的研究和觀察。

發明內容

作為各種廣泛且細致的研究和實驗的結果，本發明的發明人已經發現，在解剖學內臟標本的制作過程中，間歇性的在一定真空度下進行操作處理，并在含有戊二醛和多賴氨酸的保存液中進行長期保存，可有效保持內臟輪廓結構的清晰完好，無皺縮、膨脹、發霉等問題。基于這種發現，完成了本發明。

本發明的一個目的是解決至少上述問題和/或缺陷，并提供至少后面將說明的優點。

本發明還有一個目的是通過提供一種解剖學內臟標本的長期保存方法，提高標本的保存時間和保存質量，以維持標本的原始狀態，利于后期內臟形態學和組織學的研究和觀察。

為了實現根據本發明的這些目的和其它優點，提供一種解剖學內臟標本的長期保存方法，其包括如下步驟：

步驟1：將內臟經動脈灌水沖洗干凈；

步驟2：對所述內臟動脈灌注并浸泡在其2～3倍體積的預處理液中，0.04～0.08Mpa真空度下處理10～15min后，在常壓下浸泡3～5h，其中所述預處理液包括40～50wt％的乙醇、5～10wt％的乙酸、3～6wt的甘油、3～5wt％的硝酸鉀、30～50wt％的水，

使用乙醇對內臟標本進行固定，乙醇組織滲透能力較強，固定迅速，但乙醇對組織有一定的收縮性，乙酸的配合使用則可有效避免這一現象，以保持組織標本外觀的原有狀態，在預處理液浸泡的過程中進行真空處理，用以充分排出內臟內部的空氣，在負壓狀態下將空氣替換為預處理液，保證內臟內部空間與預處理液的成分的充分接觸，提高固定效果，此外硝酸鉀的加入進一步提高了預處理液的滲透能力，提高了固定效果，甘油的加入則提高了內臟標本的柔韌性，降低了由于固化對內臟標本帶來的硬化副作用；

步驟3：將所述預處理液用清水沖洗干凈，經動脈灌注保存液進入所述內臟，并將所述內臟浸泡在所述保存液中，每間隔2h于0.02～0.05Mpa真空度下處理20～30min，真空處理的總次數為2～3次，然后將容納所述內臟和保存液的容器密封放置，

其中，所述保存液包括1～5wt的戊二醛、0.5～2wt％的ε-ε-聚賴氨酸、1～2wt％的乳酸鈉、0.5～1.5wt％的葡萄糖酸鈉、2～4wt％的丙二醇及85～95wt％的水，

其中，戊二醛對內臟組織穿透能力較強，且有很好的殺菌作用，在解剖內臟標本的防腐保存方面性能優越，但其有一定的自聚現象，一般放置2個月左右，其抑菌效果即開始出現明顯的下降，ε-聚賴氨酸的加入可起到協同增效的作用，其與戊二醛可發生適當的交聯，明顯改善體系的穩定性，

此外，戊二醛并不破壞內臟細胞膜的半透膜特性，對細胞膜的固定效果差，而ε-聚賴氨酸可以在一定程度上破壞細胞膜的穩定性，提高其滲透性，且并不改變細胞的形狀，從而有利于戊二醛對細胞膜的固定作用，提高內臟標本的保存時間及其外觀原始狀態的維持，

此外，乳酸鈉的加入可以提高ε-聚賴氨酸的抑菌效果，葡萄糖酸鈉的加入可有效抑制內臟標本保存時的膨脹，丙二醇的添加可進一步提高體系的穩定性，保持標本色彩的自然狀態，

此外，將內臟標本浸泡在所述保存液中后，首先在一定真空度下處理2～3次，由于內臟經預處理固定后，其內部的空隙已基本成型，所以僅需在較低的真空度0.02～0.05Mpa下，即可使內臟充分浸潤在預處理液中，利于解剖內臟標本的長期保存。

優選的是，其中，所述內臟共經步驟二預處理3次，每次預處理前均更換新鮮的預處理液，以提高固定效果，利于長期保存。