[發(fā)明專利]一種利用發(fā)酵檸檬酸廢菌絲體制備甲殼低聚糖的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201510416808.2 | 申請日： | 2015-07-15 |
| 公開（公告）號： | CN104975057B | 公開（公告）日： | 2018-09-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 胡瑛;呂夢圓;蔡俊 | 申請（專利權(quán)）人： | 湖北工業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12P19/26 | 分類號： | C12P19/26;C12R1/685 |
| 代理公司： | 武漢科皓知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 張火春 |
| 地址： | 430068 湖北*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 利用 發(fā)酵 檸檬酸 菌絲體 制備 甲殼 聚糖 方法 | ||
1.一種從發(fā)酵檸檬酸的廢菌絲體中制備甲殼低聚糖的方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)將發(fā)酵檸檬酸的廢菌絲體用水沖洗，過濾，收集，然后將收集到的廢菌絲體晾干；
(2)將晾干的廢菌絲體用0.3～0.6mol/L的堿溶液浸泡，過濾，然后水洗廢菌絲體至濾液呈無色且pH≈7.0；
(3)將步驟(2)處理得到的廢菌絲體用甲殼素酶降解制備得到甲殼低聚糖溶液；
(4)將甲殼低聚糖溶液通過制備型HPLC分離、收集得到甲殼低聚糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從發(fā)酵檸檬酸的廢菌絲體中制備甲殼低聚糖的方法，其特征在于：所述步驟(3)中，在甲殼素酶降解的同時加入滅活的蝸牛酶酶解破壁。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從發(fā)酵檸檬酸的廢菌絲體中制備甲殼低聚糖的方法，其特征在于：所述步驟(3)中，將步驟(2)處理得到的廢菌絲體在甲殼素酶降解之前用蝸牛酶或纖維素酶酶解破壁。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的從發(fā)酵檸檬酸的廢菌絲體中制備甲殼低聚糖的方法，其特征在于：所述的蝸牛酶或纖維素酶酶解破壁步驟，采用的酶解緩沖液為醋酸-醋酸鈉緩沖液，蝸牛酶或纖維素酶的用量為廢菌絲體的4wt％，酶解溫度為50℃，pH為5.6，酶解時間為4小時。
5.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項所述的從發(fā)酵檸檬酸的廢菌絲體中制備甲殼低聚糖的方法，其特征在于：步驟(1)中采用60目篩網(wǎng)過濾、300目篩網(wǎng)收集廢菌絲體。
6.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項所述的從發(fā)酵檸檬酸的廢菌絲體中制備甲殼低聚糖的方法，其特征在于：步驟(2)中將晾干的廢菌絲體用0.5mol/L的NaOH溶液浸泡8小時。
7.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項所述的從發(fā)酵檸檬酸的廢菌絲體中制備甲殼低聚糖的方法，其特征在于：步驟(3)所述的甲殼素酶為基因重組蛋白，其制備方法為：重組大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)、表達(dá)，然后經(jīng)破碎、分離、純化獲得重組甲殼素酶。
8.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項所述的從發(fā)酵檸檬酸的廢菌絲體中制備甲殼低聚糖的方法，其特征在于：所述的甲殼素酶用量為廢菌絲體的0.3wt％。
9.根據(jù)權(quán)利要求1～4任一項所述的從發(fā)酵檸檬酸的廢菌絲體中制備甲殼低聚糖的方法，其特征在于：步驟(3)所述的甲殼素酶降解，降解溫度37℃，降解pH為7.0-8.0，降解時間為4天，采用的酶解緩沖液為醋酸-醋酸鈉緩沖液。
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