[發明專利]一個影響綿羊繁殖性狀的NR5A2基因啟動子區的分子標記、檢測方法及其應用

有效

• 申請號: 201510410415.0
• 申請日: 2015-07-13
• 公開（公告）號: CN104946643B
• 公開（公告）日: 2017-08-25
• 發明（設計）人: 李隱俠;張俊;曹少先;錢勇;孟春花;鐘聲;王慧利;邢光東
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12N15/11
• 分類號: C12N15/11;C12Q1/68
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司32218
• 代理人: 徐冬濤,傅婷婷

1.一種與湖羊繁殖性狀相關的分子標記，其特征在于該分子標記包含NR5A2基因啟動子區-700位點，該位點具有T/G多態性；所述的NR5A2基因啟動子區序列的Genbank登錄號為NC_019469.1；GG型和TG型綿羊個體的產仔數顯著多于TT型；所述的繁殖性狀包括頭胎產仔數、二胎產仔數、三胎產仔數和平均產仔數。

2.一種用于檢測權利要求1所述的分子標記的引物對，其特征在于上游引物P1為：SEQ ID NO：2，下游引物P2為：SEQ ID NO：3。

3.一種檢測權利要求1所述的分子標記的方法，其特征在于包含利用權利要求2所述的引物對PCR擴增湖羊基因組DNA，得到575 bp擴增產物，利用Hin6I限制性內切酶對所述的擴增產物進行酶切，電泳分型，獲得575 bp片段的定義為TT型，獲得575bp、293bp、282bp三個片段的定義為TG型， 獲得293bp、282bp兩個片段的定義為GG型。

4.一種篩選具有良好繁殖性狀的湖羊品系的方法，其特征在于包含以下步驟：

1）提取綿羊基因組DNA；

2）利用兩條特異性引物PCR擴增NR5A2基因啟動子區序列，得到575 bp擴增產物；所述的兩條特異性引物序列為P1：SEQ ID NO.1，P2：SEQ ID NO.2；

3）利用Hin6I限制性內切酶對所述的擴增產物進行酶切，電泳分型，獲得575 bp片段的定義為TT型，獲得575bp、293bp、282bp三個片段的定義為TG型， 獲得293bp、282bp兩個片段的定義為GG型；

4）GG型和TG型綿羊個體的產仔數顯著多于TT型，選擇GG型和TG型個體留種。

5.權利要求1所述的分子標記在篩選具有良好繁殖性狀的湖羊品系中的應用。

6.權利要求2所述的引物對在篩選具有良好繁殖性狀的湖羊品系中的應用。