[發(fā)明專(zhuān)利]一種菌體循環(huán)利用的葡萄糖酸鈉發(fā)酵方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510403863.8
• 申請(qǐng)日: 2015-07-10
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105385713A
• 公開(kāi)（公告）日: 2016-03-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張家祥;劉建軍;趙祥穎;田延軍;楊麗萍;范宜曉;韓延雷
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 山東省食品發(fā)酵工業(yè)研究設(shè)計(jì)院
• 主分類(lèi)號(hào): C12P7/58
• 分類(lèi)號(hào): C12P7/58
• 代理公司: 濟(jì)南泉城專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所 37218
• 代理人: 張貴賓

1.一種菌體循環(huán)利用的葡萄糖酸鈉發(fā)酵方法，其特征在于：包括以下步驟：

發(fā)酵結(jié)束所得的發(fā)酵液通過(guò)陶瓷膜過(guò)濾，過(guò)濾清液進(jìn)入提取工序，菌體濃縮液部分回流至發(fā)酵罐，然后加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行發(fā)酵，按此方法進(jìn)行菌體循環(huán)利用發(fā)酵，當(dāng)發(fā)酵速度明顯下降時(shí)停止循環(huán)，再進(jìn)行新一輪發(fā)酵。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菌體循環(huán)利用的葡萄糖酸鈉發(fā)酵方法，其特征在于：包括以下步驟：

（1）發(fā)酵：發(fā)酵罐（Ⅰ）裝入滅菌后培養(yǎng)基，接入培養(yǎng)成熟的種子液進(jìn)行發(fā)酵，直至葡萄糖耗盡發(fā)酵結(jié)束；

（2）菌體濃縮：采用孔徑為100-200nm的陶瓷膜對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾清液進(jìn)入提取工序，當(dāng)菌體濃縮液體積至總發(fā)酵液體積的10-20%時(shí)停止過(guò)濾，將40-60%的菌體濃縮液泵送至含有新鮮培養(yǎng)基的發(fā)酵罐（Ⅱ）內(nèi)進(jìn)行葡萄糖酸鈉發(fā)酵，剩余的菌體濃縮液經(jīng)板框過(guò)濾除菌后進(jìn)入提取工序；

（3）菌體循環(huán)利用發(fā)酵：循環(huán)步驟（2），當(dāng)發(fā)酵速度下降10-15%時(shí)，中止循環(huán)，菌體濃縮液全部經(jīng)板框過(guò)濾除菌后進(jìn)入提取工序；

（4）重復(fù)步驟（1）-（3）：開(kāi)始新一輪菌體循環(huán)利用葡萄糖酸鈉發(fā)酵。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的菌體循環(huán)利用的葡萄糖酸鈉發(fā)酵方法，其特征在于：步驟（1）發(fā)酵之前，先經(jīng)菌種擴(kuò)大培養(yǎng)，所述菌種擴(kuò)大培養(yǎng)為：一級(jí)種子罐培養(yǎng)基滅菌后接入黑曲霉麩曲孢子菌種，培養(yǎng)至成熟，按10-20%接入滅菌后的二級(jí)種子罐進(jìn)行二級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的菌體循環(huán)利用的葡萄糖酸鈉的發(fā)酵方法，其特征在于：上述步驟（1）中，種子培養(yǎng)基：葡萄糖150-180g/L，硫酸銨0.2-0.6g/L，磷酸氫二鉀0.1-0.5g/L，硝酸銨0.1-0.3g/L，硫酸鎂0.1-0.3g/L，種子培養(yǎng)控制條件：培養(yǎng)溫度36.0-37.0℃，溶解氧濃度10-20%，pH值=6.0-6.5，種子罐壓力0.05-0.15MPa。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的菌體循環(huán)利用的葡萄糖酸鈉的發(fā)酵方法，其特征在于：上述步驟（2）中，發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖270-300g/L，硫酸銨0.2-0.6g/L，磷酸氫二鉀0.1-0.5g/L，硝酸銨0.1-0.3g/L，硫酸鎂0.1-0.3g/L，發(fā)酵過(guò)程控制條件：發(fā)酵溫度37.0-37.5℃，溶解氧濃度20-30%，pH值=5.5-6.0，發(fā)酵罐壓力0.05-0.15MPa。