[發明專利]多特異性受體的改進的純化

有效

• 申請號: 201510402476.2
• 申請日: 2010-09-16
• 公開（公告）號: CN105080183B
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 尼古拉斯·奧托·克羅赫;克勞斯·格利高里斯
• 申請（專利權）人: 米普薩盧斯公司
• 主分類號: B01D15/38
• 分類號: B01D15/38;A61K31/74;A61P19/06;A61P21/04
• 代理公司: 北京安信方達知識產權代理有限公司11262
• 代理人: 王思琪,鄭霞

1.一種制備富集與因子結合的受體的組合物的方法，其中所述受體各自特異性結合所述因子上的至少兩個不連續位點，所述方法包括：

a.提供包含所述受體的樣品，

b.對所述樣品進行第一親和層析步驟，其中所述因子用作親和純化劑，且其中經由與所述至少兩個不連續位點的單個位點結合將所述因子固定在固相或半固相上，

c.回收與所述因子結合的受體，

d.對前述步驟中回收的受體進行至少一個另外的親和層析步驟，其中所述因子用作親和純化劑，且其中經由與所述至少兩個不連續位點的另一個位點結合將所述因子固定在固相或半固相上，并回收與所述因子結合的受體，

其中，在每一個所述至少一個另外的親和層析步驟中，所述至少兩個不連續位點的所述另一個位點與已用于前述步驟b和d中將所述因子固定在固相或半固相上的所述至少兩個不連續位點的任何一個位點不同，并且其中

所述受體選自由在其表面上表達抗體片段的噬菌體顆粒群體、分子印跡聚合物(MIP)和多克隆抗體組成的組。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述受體選自可溶性MIP或不溶性MIP。

3.根據權利要求2所述的方法，其中所述受體為不溶性MIP。

4.根據權利要求2所述的方法，其中所述受體為可溶性MIP。

5.根據權利要求1所述的方法，其中所述受體為單特異性多克隆抗體。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的方法，其中所述第一親和層析步驟和所述至少一個另外的親和層析步驟包括使用流化床系統。

7.根據權利要求6所述的方法，其中所述流化床系統為膨脹床系統。

8.根據權利要求1-5中任一項所述的方法，其中所述因子是具有式H₃N⁺-CH(R)-COO^-的化學物質或具有至多5個氨基酸殘基的肽。

9.根據權利要求8所述的方法，其中所述因子是氨基酸。

10.根據權利要求9所述的方法，其中所述氨基酸選自苯丙氨酸、酪氨酸、組氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、色氨酸、蘇氨酸、纈氨酸和賴氨酸。

11.根據權利要求8所述的方法，其中所述肽在其序列中包括選自由苯丙氨酸、酪氨酸、組氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、色氨酸、蘇氨酸、纈氨酸和賴氨酸組成的組的至少一種氨基酸。

12.根據權利要求11所述的方法，其中所述肽在N端、在C端或在兩端具有選自由苯丙氨酸、酪氨酸、組氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、異亮氨酸、色氨酸、蘇氨酸、纈氨酸和賴氨酸組成的組的氨基酸。

13.根據權利要求8所述的方法，其中所述肽為二肽、三肽、四肽或五肽。

14.根據權利要求11所述的方法，其中所述肽為二肽、三肽、四肽或五肽。

15.根據權利要求1-5任一項所述的方法，其中所述因子是碳水化合物。

16.根據權利要求15所述的方法，其中所述碳水化合物是具有最多10個單糖單元的支鏈或線性低聚糖。

17.根據權利要求15所述的方法，其中所述碳水化合物選自單糖、二糖和三糖。

18.根據權利要求17所述的方法，其中所述碳水化合物選自D-半乳糖和乳糖。

19.根據權利要求1-5任一項所述的方法，其中所述因子是脂肪酸或脂質。

20.根據權利要求19所述的方法，其中所述因子是選自由膽固醇、甘油三酯、和膽汁酸或其鹽組成的組的脂質。

21.根據權利要求1-5任一項所述的方法，其中所述因子是寡核苷酸或寡核苷酸衍生物。

22.根據權利要求21所述的方法，其中所述寡核苷酸或寡核苷酸衍生物選自由RNA寡核苷酸、DNA寡核苷酸、LNA寡核苷酸、PNA寡核苷酸和混合寡核苷酸組成的組。

23.根據權利要求21所述的方法，其中所述寡核苷酸是混合寡核苷酸，所述混合寡核苷酸包括至少一個核糖核苷酸單元或脫氧核糖核苷酸單元和至少一個LNA核苷酸單元或PNA核苷酸單元。