[發明專利]一種低溫快速成型三維打印膠原絲素蛋白材料

在審

• 申請號: 201510400438.3
• 申請日: 2015-07-09
• 公開（公告）號: CN105031728A
• 公開（公告）日: 2015-11-11
• 發明（設計）人: 陳旭義;涂悅;李瑞欣;張賽;湯鋒武;馬軍;劉紅斌;楊凱
• 申請（專利權）人: 中國人民武裝警察部隊后勤學院附屬醫院
• 主分類號: A61L27/26
• 分類號: A61L27/26;A61L27/58;A61L27/24;A61L27/22
• 代理公司: 天津濱海科緯知識產權代理有限公司 12211
• 代理人: 李莉華

1.一種低溫快速成型三維打印膠原絲素蛋白材料，其特征在于：所述膠原/絲素蛋白材料由如下質量份數的組份制備而成：

2.根據權利要求1所述的膠原絲素蛋白材料，其特征在于：所述膠原/絲素蛋白材料如下質量份數的組份制備而成：

3.一種低溫快速成型三維打印膠原絲素蛋白材料的制備方法，其特征在于：分別配置1-3％膠原蛋白溶液和0.5-20％絲素蛋白溶液，靜置24-48h后，按照絲素蛋白和膠原蛋白質量比為6-45：40-80均勻混合，加入甘油和相容劑，低溫及冷凍干燥后，制備獲得膠原/絲素蛋白材料。

4.根據權利要求3所述的膠原絲素蛋白材料的制備方法，其特征在于：所述低溫干燥的溫度不高于-5℃。

5.根據權利要求3所述的膠原絲素蛋白材料的制備方法，其特征在于：所述膠原蛋白溶液的制備方法包括如下步驟：

(a)將富含膠原蛋白的動物組織去除血管、肌肉和表皮等雜質，清洗干凈后用弱堿溶液脫脂；

(b)脫脂后溶解于稀酸溶液，攪拌混勻后加入復合蛋白酶，膠原蛋白與復合蛋白酶質量比為500-1000:1，繼續攪拌過夜；

(c)離心，收集上清液，加入NaCl，攪拌，收集沉淀物，加入乙酸，重復步驟(c)操作3-4次后，得到的沉淀物為膠原蛋白，將膠原蛋白溶解于0.01-0.1％乙酸溶液中，獲得1-3％的膠原蛋白溶液。

6.根據權利要求5所述的膠原絲素蛋白材料的制備方法，其特征在于：所述步驟(a)中的弱堿溶液為pH8.0-12的NaOH。

7.根據權利要求5所述的膠原絲素蛋白材料的制備方法，其特征在于：所述步驟(b)中的稀酸溶液為pH5.0-6.5的乙酸或鹽酸。

8.根據權利要求3所述的膠原絲素蛋白材料的制備方法，其特征在于：所述絲素蛋白溶液的制備方法包括如下步驟：

(d)取蠶絲，加入0.5-1％的Na₂CO₃稀堿溶液中，高溫清煮30-60min，蒸餾水反復清洗；重復清煮及清洗2-3次，真空干燥完成脫膠；

(e)將脫膠后成分以質量比1:10比例置于LiBr溶液中，50-60℃水浴箱保溫直至溶解；

(f)溶解液置于透析袋中用蒸餾水勻速透析，得到絲素蛋白溶液，所述絲素蛋白溶液的濃度為0.5-20％，5℃儲存，使用時⁶⁰Co照射滅菌。

9.一種低溫快速成型三維打印膠原絲素蛋白材料的應用，其特征在于：膠原/絲素蛋白材料作為生物支架材料使用時，細胞或生長因子可貼服或融合與膠原/絲素蛋白材料的內外表面；優選的，所述細胞為神經干細胞、少突膠質細胞、神經元或星形膠質細胞。

10.一種低溫快速成型三維打印膠原絲素蛋白材料的打印方法，其特征在于：將膠原/絲素蛋白材料的溶液置于生物打印機材料儲存器中，生物打印機針頭直徑為60—400μm，針頭數量為6—16個，針頭到基底打印層為100—300μm，打印速度2-10mm/秒，打印間隙為100μm—400μm，溫度設置為-30℃—5℃，打印。