[發明專利]一種無動物來源成分的外周血淋巴細胞培養基

有效

• 申請號: 201510399372.0
• 申請日: 2015-07-09
• 公開（公告）號: CN105018425B
• 公開（公告）日: 2018-09-28
• 發明（設計）人: 邱壯偉;丘力功;倪世明
• 申請（專利權）人: 廣州白云山拜迪生物醫藥有限公司
• 主分類號: C12N5/0783
• 分類號: C12N5/0783
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 胡輝;鄭瑩

本發明公開了一種無動物來源成分的外周血淋巴細胞培養基，其主要組成包括：基礎培養基、L型植物血球凝集素、復合氨基酸、亞硒酸鈉、檸檬酸鐵、重組人胰島素及緩沖體系。本發明的無動物來源成分的外周血淋巴細胞培養基不含有動物或人的血清，避免了使用動物血清可能導致的安全問題，同時可以降低產品生產成本，增強產品不同批次間的質量穩定性，提升細胞培養效果，為臨床檢驗提供安全可靠的試劑。

技術領域

本發明涉及一種無動物來源成分的外周血淋巴細胞培養基。

背景技術

隨著細胞遺傳學的發展，外周血淋巴細胞染色體核型分析已成為產前診斷的常規檢測項目。而要獲得數目多的可供核型分析的分裂相細胞，淋巴細胞的體外培養增殖是基礎。

細胞體外培養系統是在體外模擬細胞在體內環境生長而建立的，而來源于動物或者是人類的血清被廣泛用于細胞的維持和增殖。血清中含有細胞存活和生長所必須的成分：生長因子，細胞因子，粘附因子，蛋白，維生素，微量元素和激素等，血清還可以作為緩沖劑、螯合劑。另外，血清中的白蛋白，胎球蛋白和其他蛋白能夠影響細胞培養系統的物理特性，如pH，剪切力，粘度，滲透壓和氣體傳遞率等。

然而，使用血清也存在許多問題。價格昂貴，血清價格不斷上漲，費用約占到培養基成本一半；血清質量參差不齊，存在質量不穩定性，會導致生產及產品質量的差異；另外，血清中存在支原體和其它病毒異源污染，造成生物產品的安全性問題，雖然可以經滅活處理，但是，這樣的處理會影響血清的促細胞生長能力。

為了解決血清在廣泛運用上的問題，企業逐漸轉向了無血清、無動物衍生成分甚至化學成分確定培養基的開發。

發明內容

本發明的目的在于提供一種無動物來源成分的外周血淋巴細胞培養基

本發明所采取的技術方案是：

一種無動物來源成分的外周血淋巴細胞培養基，其主要組成包括：基礎培養基、L型植物血球凝集素、復合氨基酸、亞硒酸鈉、檸檬酸鐵、重組人胰島素、緩沖體系。

作為優選的，所述基礎培養基為RPMI1640培養基。

作為優選的，所述復合氨基酸包括：L-谷氨酸 300mg/L、L-甘氨酸100mg/L、L-天冬氨酸400mg/L、L-絲氨酸360 mg/L、L-蘇氨酸 80 mg/L、L-亮氨酸80 mg/L、L-脯氨酸200 mg/L。

作為優選的，所述緩沖體系為NaHCO₃。

作為優選的，所述培養基中各組分的含量為：基礎培養基10-10.5 g/L，L型植物血球凝集素18-22 mg/L，復合氨基酸 18-22 ml/L、亞硒酸鈉50-70 n mol /L、檸檬酸鐵0.5-1.5 mg/L、重組人胰島素8-12 mg/L，緩沖體系1.8-2.2 g/L。

本發明的有益效果是：

本發明的無動物來源成分的外周血淋巴細胞培養基不含有動物或人的血清，避免了使用動物血清可能導致的安全問題，同時可以降低產品生產成本，增強產品不同批次間的質量穩定性，提升細胞培養效果，為臨床檢驗提供安全可靠的試劑。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步的說明，但并不局限于此。

實施例1

1、1L氨基酸母液的配制：在500 mL注射用水中分別加入L-谷氨酸 300 mg、L-甘氨酸100 mg、L-天冬氨酸400 mg、L-絲氨酸360 mg、L-蘇氨酸 80 mg、L-亮氨酸80 mg、L-脯氨酸200 mg，攪拌溶解后定容至1.0L 。分裝后4℃貯存備用。實施例1-3的培養基均使用本氨基酸母液。