[發明專利]PCSK9蛋白的D374Y突變體在抑制肝癌細胞遷移中的應用

有效

• 申請號: 201510399014.X
• 申請日: 2015-07-08
• 公開（公告）號: CN104988130B
• 公開（公告）日: 2018-08-14
• 發明（設計）人: 牟玉蓮;李奎;黃雷;劉嵐;高倩;魏景亮;劉洋;吳添文;夏穎
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院北京畜牧獸醫研究所
• 主分類號: C12N9/64
• 分類號: C12N9/64;C12N15/57;C12N15/867;C12N5/10;A61P35/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;張立娜

本發明公開了一種PCSK9蛋白的D374Y突變體在抑制肝癌細胞遷移中的應用。本發明所提供的應用具體為序列表中序列1所示蛋白質在如下任一中的應用：(a1)制備抑制肝癌細胞遷移的產品；(a2)抑制肝癌細胞遷移。實驗證明，PCSK9蛋白的D374Y突變體過表達對HepG2細胞的增殖能力無明顯的影響，但是顯著抑制細胞的遷移能力；PCSK9蛋白的D374Y突變體對肝癌細胞的遷移能力的抑制是通過Erk信號通路的調控起作用的。本發明對肝癌的治療具有重要意義。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，涉及一種PCSK9蛋白的D374Y突變體在抑制肝癌細胞遷移中的應用。

背景技術

前蛋白轉化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin-like/kexintype 9，PCSK9)是繼LDLR、APOB后被定位的第三個ADH(autosomal dominanthypercholesterolemia)主效基因。該基因由Seidah et al.首次克隆得到，并定義為細胞凋亡調節轉化酶1(apoptosis-regulated convertase 1，Narc-1)，指出其在肝再生和神經元分化過程中的潛在作用。PCSK9蛋白主要表達于具有再生和分化能力的細胞中。PCSK9在肝臟的細胞的功能主要表現為對(low-density lipoprotein receptor，LDLR)的翻譯后調控作用：PCSK9分泌蛋白能與肝細胞膜上LDLR相結合，介導PCSK9-LDLR復合體的胞內溶酶體降解過程，而不影響LDLR的內吞作用和載脂蛋白B(apolipoprotein B,apoB)的合成，因此PCSK9的高表達或功能獲得性突變與動脈粥樣硬化疾病有直接的關系。近年來的研究報道顯示，PCSK9參與多種細胞功能的調節，如影響肝臟損傷修復、膽固醇運輸、細胞凋亡等性狀。如果PCSK9基因缺失，肝臟再生能力將顯著下降。PCSK9能夠促進小腸上皮細胞對膽固醇的吸收能力。PCSK9對細胞凋亡的調控具有組織特異性。在肝臟中，PCSK9能夠下調TNF-α通路，抑制肝細胞的凋亡；而在神經細胞中通過作用于載脂蛋白E受體2(apolipoprotein Ereceptor 2，ApoER2)，參與神經凋亡過程，但不完全依賴caspase途徑；在內皮細胞中，抑制PCSK9基因的表達可以降低ox-LDL誘導的HUVECs(human umbilical vein endothelialcells)細胞的凋亡效應；在巨噬細胞中PCSK9的表達量與巨噬細胞炎癥反應的敏感性正相關，oxLDL誘導THP-1來源的巨噬細胞中PCSK9的表達，而PCSK9的干擾抑制炎癥因子的表達，使IkappaB-alpha的降解和NF-kappaB的核轉運受到抑制。

綜上所述，PCSK9對細胞功能具有重要的調節作用，特別參與肝臟細胞的多種生物學過程。然而，目前的研究報道中未見PCSK9對肝癌細胞遷移影響的相關報道。

發明內容

本發明的一個目的是提供一種PCSK9蛋白的D374Y突變體在抑制肝癌細胞遷移中的應用。

所述PCSK9蛋白的D374Y突變體具體為序列表中序列1所示蛋白質；所述應用具體為在如下任一中的應用：

(a1)制備抑制肝癌細胞遷移的產品；

(a2)抑制肝癌細胞遷移；

(a3)下調Erk蛋白的磷酸化水平。

編碼序列表中序列1所示蛋白質的基因(即所述PCSK9蛋白的D374Y突變體的編碼基因)在如下任一中的應用也屬于本發明的保護范圍：

(a1)制備抑制肝癌細胞遷移的產品；

(a2)抑制肝癌細胞遷移；

(a3)下調Erk蛋白的磷酸化水平。

含有所述基因的表達盒、重組載體、轉基因細胞系或重組菌在如下任一中的應用也屬于本發明的保護范圍：