[發明專利]一種檢測ERCC2基因多態性的引物與方法

在審

• 申請號: 201510384760.1
• 申請日: 2015-06-30
• 公開（公告）號: CN105039529A
• 公開（公告）日: 2015-11-11
• 發明（設計）人: 趙薇薇;胡昌明;燕啟江;郭周萍
• 申請（專利權）人: 廣州金域醫學檢驗中心有限公司;廣州醫科大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 北京精金石專利代理事務所(普通合伙) 11470
• 代理人: 劉曄

1.一種檢測ERCC2基因多態性的引物，其特征在于：包括PCR擴增引物和SNaPshotPCR引物；所述PCR擴增引物包括：針對ERCC2_L751Q的上游引物5’-GGCAAGACTCAGGAGTCACC-3’和下游引物5’-CCCTCTCCCTTTCCTCTGTT-3’；所述SNaPshotPCR引物包括：針對ERCC2_L751Q的SNaPshotPCR引物5’-TTTTTTTAGCAGCTAGAATCAGAGGAGACGCTG-3’。

2.一種檢測ERCC2基因多態性的方法，其特征在于：包括如下步驟：A）提取DNA樣品；B）采用權利要求1中所述的PCR擴增引物進行PCR擴增，對擴增產物進行純化；C）采用權利要求1中所述的SNaPshotPCR引物進行SNaPshotPCR擴增，對擴增產物進行純化；D）毛細管電泳技術進行檢測，對檢測結果進行分析，確定SNP位點及其基因型。

3.根據權利要求2所述的檢測ERCC2基因多態性的方法，其特征在于：所述步驟A）中的DNA樣品為EDTA抗凝外周血的DNA樣品。

4.根據權利要求2所述的檢測ERCC2基因多態性的方法，其特征在于：所述步驟B）中的PCR擴增反應條件包括：階段1：98℃3min；階段2：98℃10s；階段3：58℃30s；階段4：72℃1min；階段5：返回到階段2，29個循環；階段6：72℃5min；階段7：25℃保溫。

5.根據權利要求2所述的檢測ERCC2基因多態性的方法，其特征在于：所述步驟C）中的SNaPshotPCR擴增反應條件包括：階段1：96℃10s；階段2：55℃5s；階段3：60℃30s；階段4：返回到階段1，25個循環；階段5：4℃保溫。

6.根據權利要求2所述的檢測ERCC2基因多態性的方法，其特征在于：所述步驟D）中，采用GENEMAPPERIDV4.1軟件對檢測結果進行分析。

7.根據權利要求1所述的檢測ERCC2基因多態性的引物在制備檢測ERCC2基因多態性試劑中的用途。