[發明專利]馬鮫魚精液的超低溫冷凍保存方法

在審

• 申請號: 201510380279.5
• 申請日: 2015-07-02
• 公開（公告）號: CN105010305A
• 公開（公告）日: 2015-11-04
• 發明（設計）人: 鄭春靜;劉軍
• 申請（專利權）人: 寧波市海洋與漁業研究院
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務所(普通合伙) 33226
• 代理人: 程曉明

技術領域

?本發明涉及魚類精液的保存，具體涉及馬鮫魚精液的超低溫冷凍保存方法。

背景技術

馬鮫魚屬鱸形目，鲅科，是一種重要的海洋經濟魚類。雖然馬鮫魚人工繁殖和養殖難度較大，但目前已獲得初步成果。馬鮫魚批量人工繁殖中，對馬鮫魚精液的保存也是關健點。魚類精液的保存方法多種多樣，如4℃常溫保存，低溫保存，超低溫冷凍保存，不同的方法保存液也有所不同，超低溫冷凍保存的保存液稱為冷凍保存液，簡稱凍存液，如公開號為CN104604845就公開了哲羅鮭精液的冷凍保存液及保存方法，其凍存液的組成為氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、碳酸氫鈉、磷酸二氫鉀、葡萄糖和水，其保存方法為凍存液中加入適量丙三醇，4℃下平衡，然后加入精液，4℃下平衡，再用二次加入適量丙三醇平衡，然后在液氮中速凍凍存。該凍存方法較復雜，要多次用丙三醇平衡，但凍存液仍為液態，在液氮中速凍時有可能凍壞精子。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種方法簡單，速凍時精子不會凍壞的馬鮫魚精液的超低溫冷凍保存方法。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：馬鮫魚精液的超低溫冷凍保存方法，其步驟如下：

a、按體積比1：3～5的比例，將精液和凍存液放入冷凍管，封蓋，然后冷凍管浸入布滿干冰和異丙醇的盒子降溫，降溫至冷凍管內凍存液凍結，該盒子內先堆滿干冰，再在干冰間隙中注滿異丙醇；

b、取出冷凍管放入液氮中保存。

與現有技術相比，本發明的優點在于馬鮫魚精液的超低溫冷凍保存方法，精液和凍存液先在異丙醇和干冰作用下降溫，其中干冰為冷凍介質，異丙醇為降溫的梯度介質，可以在不損傷精子情況下，使冷凍管內凍存液逐漸凍結，再在液氮中保存，這樣在液氮中速凍前，精子已凍結，速凍就不會損傷精子，因此本發明是一種方法簡單，速凍時精子不會凍壞的馬鮫魚精液的超低溫冷凍保存方法。

具體實施方式

以下結合實施例對本發明作進一步詳細描述。

實施例1

吸取新鮮精液1ml，放入冷凍管，再加入4ml凍存液混合，封蓋，然后冷凍管浸入布滿干冰和異丙醇的盒子降溫，盒子內先堆滿干冰，再在干冰間隙中注滿異丙醇，降溫幾小時后，冷凍管內凍存液凍結，取出冷凍管放入液氮中保存。

實施例2

與實施例1基本相同，所不同的只是精液為5ml，凍存液為15ml。

實施例3

與實施例1基本相同，所不同的只是精液為3ml，凍存液為15ml。