[發(fā)明專利]一種復(fù)合菌劑及其水溶肥和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201510369958.2
• 申請(qǐng)日: 2015-06-29
• 公開（公告）號(hào): CN105039210B
• 公開（公告）日: 2019-09-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 任莉;靳曉藜;王凱;彭生平
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 北京沃土天地生物科技股份有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;C12N1/16;C05G3/00;C12R1/125;C12R1/10;C12R1/07
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

1.一種復(fù)合菌劑，其特征在于，由如下方法制得：

1)將OD值為3.5～4.0的枯草芽孢桿菌、3.0～4.0的酵母菌、3.5～4.0的膠質(zhì)芽孢桿菌和3.5～4.0的地衣芽孢桿菌的種子液按體積比1～5:1～5:1～5:1～5混合，得混合種子液；

2)將所述混合種子液在酵母發(fā)酵的副產(chǎn)物中進(jìn)行高密度混合發(fā)酵培養(yǎng)，至活菌數(shù)總數(shù)大于10億/mL且小于100億/mL時(shí)，停止培養(yǎng)，得所述復(fù)合菌劑；所述酵母發(fā)酵的副產(chǎn)物為酵母發(fā)酵后的液體，其有機(jī)質(zhì)含量為20％～45％，無機(jī)氮的含量為1％～6％，無機(jī)磷的含量為0.3％～0.8％，無機(jī)鉀的含量為4.0％～5.5％。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合菌劑，其特征在于，所述高密度混合發(fā)酵培養(yǎng)的條件為：起始0～24小時(shí)內(nèi)，間隔通氣，保持在有氧條件發(fā)酵，之后的培養(yǎng)過程中，調(diào)控發(fā)酵液溶解氧5～15％，攪拌器轉(zhuǎn)速150-200r/min，攪拌間隔時(shí)間1～3小時(shí)，攪拌1～3分鐘。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合菌劑，其特征在于，所述高密度混合發(fā)酵培養(yǎng)采用分批補(bǔ)料的培養(yǎng)方式，其中補(bǔ)料碳源為：葡萄糖、甘油、蔗糖、糖蜜其中任一種或幾種的混合物；氮源為：硫酸銨、牛肉膏、蛋白胨其中任一種或幾種的混合物。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合菌劑，其特征在于，所述混合種子液的接種量為5-20％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)合菌劑，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌、酵母菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌種子液制備包括如下步驟：

1)菌種活化：將枯草芽孢桿菌、酵母菌、膠質(zhì)芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的原始菌種分別接種于各自的固體培養(yǎng)基上，酵母菌在溫度15～38℃的條件下培養(yǎng)2～6天，枯草芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌在溫度15～42℃的條件下培養(yǎng)1～3天，得到活化后的菌種；

2)一級(jí)種子培養(yǎng)：將活化后的菌種分別接種于各自的液體培養(yǎng)基中，酵母菌在溫度15～38℃，搖床轉(zhuǎn)速100～200r/min的條件下培養(yǎng)2～6天，枯草芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌在溫度15～42℃，搖床轉(zhuǎn)速100～200r/min的條件下培養(yǎng)1～3天，至各菌種液體培養(yǎng)基的OD600值位于3.0～4.0之間時(shí)停止培養(yǎng)，制得一級(jí)種子；

3)二級(jí)種子培養(yǎng)：按一級(jí)種子培養(yǎng)液的體積比為5～20％，將一級(jí)種子分別接種于裝有各菌種液體培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，酵母菌在溫度15～38℃，攪拌速度100～200r/min，通氣量0.5～1.5vvm的條件下培養(yǎng)至其OD值為3.0～4.0，枯草芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌在溫度15～42℃，攪拌速度為100～200r/min，通氣量為0.5～1.5vvm的條件下培養(yǎng)至其OD值為3.5～4.0，制得二級(jí)種子，即為所述種子液。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的復(fù)合菌劑，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌的液體培養(yǎng)基為NA培養(yǎng)基，酵母菌的液體培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基，膠質(zhì)芽孢桿菌的液體培養(yǎng)基為鉀細(xì)菌培養(yǎng)基，其固體培養(yǎng)基為在各自的液體培養(yǎng)基中添加瓊脂。

7.一種水溶肥，其特征在于，由如下百分含量的組分組成：磷酸一銨4-8％、尿素3-6％，磷酸二氫鉀2-6％，以及權(quán)利要求1-6中任一權(quán)利要求所述的復(fù)合菌劑余量。

8.權(quán)利要求1～6中任一權(quán)利要求所述的復(fù)合菌劑和權(quán)利要求7所述的水溶肥在植物培養(yǎng)中的應(yīng)用。